18.01.2009, 17:36
שלום!
אני מבקש ממך להמליץ על פתרון למצב הבא. תמיד היו לי בעיות בטיפולי שיניים, לא כל כך מזמן הייתי צריך להסיר מספר שיניים. Septonest שימש להרדמה. לאחר הצגתו, הלחץ עלה ל-190 והחלה טכיקרדיה של 150 פעימות לדקה. (הלחץ שלי הוא 110) לאחר הזרקת טבגיל, הלחץ התחיל להתנרמל. למחרת נצפתה צרידות. הרופא חושב שיש לי התווית נגד לחומרי הרדמה: אפסטזין, אולטראקאין, ספטונס.
מכיוון שאני עדיין צריך לטפל בשיניים, מה עלי לעשות?
19.01.2009, 00:06
לפני המקרה הזה, האם כבר טיפלת בשיניים שלך בהרדמה? האם זריקות הרדמה בעבר לוו גם בתגובה כזו, או שזו הפעם הראשונה? מתעניין גם באיזה סוג של הרדמה בוצעה וריכוז האדרנלין בחומר ההרדמה המשומש ונוכחות מחלות של מערכת הלב וכלי הדם
תגובה דומה עשויה להיות קשורה לחדירת חומר הרדמה לתוך כלי דם(בסוגי הרדמה מסוימים יש אפשרות להיכנס לכלי דם). כמו כן, תסמינים כאלה עשויים להיות תגובה לאדרנלין, שהוא חלק מחומר ההרדמה.
בבית החולים שלנו מטופלים עם אי סבילות לחומרי הרדמה מקומיים מופנים למחלקה לרפואת שיניים כירורגית בבית החולים, שם הם נבדקים ומטופלים בהרדמה מקומית או בהרדמה.
19.01.2009, 09:51
תודה על התגובה המהירה! לפני כן, במהלך התערבויות קלות, נעשה שימוש בלידוקאין ולאחרונה הסירה שומה על פניה עם השימוש בו. היא סבלה את זה היטב, אבל המינון, כנראה, היה קטן.
השתמשו בספטונסט פעמיים, השנייה שתיארתי לך, והראשונה גם ברפואת שיניים, ולאחר מכן לחץ דם גבוהעד 140 ותוך 5-6 שעות לא יכול היה לעצור את הדימום מהשן.
מ מחלות לב וכלי דםיש הפרעת קצב חוץ-סיסטולית.
הרופא כתב לי התוויות נגד: תמיסת ubestezin 4 u, תמיסה אולטרה-קיין 2 u, תמיסת ספטון. לצערי, אני לא יכול לענות על ריכוז האדרנלין.
18.02.2009, 18:33
שלום,
עשה ניתוח אימונולוגי לחומרי הרדמה ואלו התוצאות:
1. Ultracain D-S - 81 (11%)
2. Ultracaine D-S forte - 61 (32%)
3. אננלין - 64 (29%)
4. לידוקאין - 58 (36%)
5. Scandonest - 76 (16%)
6. אובסטזין פורטה - 58 (36%)
7. ספטנסט עם אדרנלין - 65 (28%)
לפי מידת הפעילות:
מסתבר שלא ניתן להשתמש בתרופות אלו (כולן > 10%) במהלך הרדמה ברפואת שיניים. ומה אפשר לעשות עכשיו?
18.02.2009, 21:12
אתן לך רמז לגבי הערך של הניתוח:
"התגובה של לויקוציטוליזה ספציפית הראתה שינוי במספר הלויקוציטים ביחס ל-91 הביקורת (100%) עם תרופות:
...
4. לידוקאין - 58 (36%)
...
תמוגה עד 11% - חיובי חלש
תמוגה עד 21% -40% - חיובי בינוני
תמוגה עד 41% -100% - חיובי חד
לפני כן, במהלך התערבויות קלות, נעשה שימוש בלידוקאין ולאחרונה הסירה שומה על פניה עם השימוש בו. הועבר היטב
Dubovoy B.L., Polyakova O.N. GNU SKZNIVI, נובוצ'רקסק
שחפת גורמת לנזק כלכלי עצום ומהווה איום גדול על בריאות האדם. המשימה העיקרית בפעילות נגד שחפת היא אבחון בזמן, זיהוי מוקדם יותר של מקור הגורם המדבק.
אבחון תוך-ויטלי על ידי מחקר אלרגי הוא מאוחר ואינו מגלה בעלי חיים בימים הראשונים, ואפילו חודשים לאחר הדבקתם. לכן, נדרשות שיטות רגישות יותר כדי לחשוף את האטיולוגיה של התהליך האלרגי בשחפת.
כדי להבדיל בין תגובות טוברקולין לא ספציפיות, נעשה שימוש בבדיקה סימולטנית עם אלרגנים - PPD ליונקים ו-KAM, העשויה ממספר זנים של מיקובקטריות לא טיפוסיות. בדיקת אלרגיה סימולטנית משמשת לאבחון ראשוני של טוברקולין בחוות משגשגות ובמקרה של תגובות לטוברקולין עקב מיקובקטריות לא טיפוסיות וספרופיטים עמידים לחומצה. הם גם פונים לשחיטת נציבות ושחיטה אבחנתית של בעלי חיים עם תגובה למתן תוך עורי של טוברקולין, כדי להבהיר את האבחנה על ידי מחקרים פתואנטומיים, בקטריולוגיים ובדיקה ביולוגית.
עם זאת, הבעלים של פרות בעלות תנובה גבוהה חולקים על תקפותה של שחיטת הבקרה והאבחון של בעלי חיים שנתנו תגובה חיובית לבדיקת טוברקולין, ודורשים שיטות אבחון תוך-חייתי עבור מחקר נוסףבעלי חיים פרודוקטיביים ביותר לשחפת. לכן, בנוסף לבדיקה אלרגית סימולטנית, בדיקות לאחר המוות ו מחקר מעבדה, בדיקה אפיזוטולוגית של חוות, ניתוח הדינמיקה של הביטוי של תגובות אלרגיות ב קבוצות שונותבעלי חיים, כדי לחקור תגובות טוברקולין לא ספציפיות בגדול בקרוהבידול שלהם מאלו הספציפיים, נעשה שימוש בתגובות תאיות במבחנה - התגובה של טרנספורמציה של פיצוץ של לימפוציטים ותמוגה ספציפית של לויקוציטים ותגובות אחרות.
במחקר שלנו, כדי לזהות את הגורמים לתגובות טוברקולין לא ספציפיות, השתמשנו בתגובה של תמוגה ספציפית של לויקוציטים בהשוואה לשינויים פתולוגיים.
ההגדרה של RSLL בוצעה בשינוי של B.L. אַלוֹן.
מטרת המחקר הייתה לזהות את הגורמים לתגובות לא ספציפיות הקשורות ל אבחנה מבדלתשחפת הנגרמת על ידי סוגים שונים של חיידקי מיקובקטריה, שהיא בעלת חשיבות וטרינרית, סניטרית, אפיזואטית וכלכלית רבה.
זיהוי בעלי חיים שנדבקו במיקובקטריה וחולים עם שחפת על ידי תגובה של תמוגה ספציפית של לויקוציטים (RSLL) במבחנה מבוסס על התופעה של רגישות מוגברת של לויקוציטים המופיעה מיד למגע חוזר עם אנטיגן (אלרגן) מחוץ לגוף.
בתנאי ייצור, בדיקת RSLL עבור אבחנה אפשריתשחפת בוצעה בחוות הבסיס של מחוז רוסטוב. אז בחווה משגשגת בעבר, שמונה פרות הגיבו לטוברקולין. הם היו נתונים לשחיטה בקרה ואבחון. במהלך הבדיקה הווטרינרית והסניטרית של שינויים פתואנטומיים במהלך איברים פנימייםו בלוטות לימפהלא זוהה חזותית. מחקרים בקטריולוגיים של החומר הפתולוגי במעבדה האזורית ברוסטוב היו שליליים.
לפני השחיטה, דם נלקח מפרות לתגובה של תמוגה ספציפית של לויקוציטים (RSLL). תוצאות מחקרים על מספר הלויקוציטים ואינדיקטורים של RSLL בדגימות דם מוצגות בטבלה.
שולחן. מספר הלויקוציטים, מדדי ROLL ושינויים פתואנטומיים בפרות שהגיבו לטוברקולין.
כפי שניתן לראות מהטבלה, בכל דגימות הדם עם PPD-טוברקולין ליונקים, התגובה של תמוגה ספציפית של לויקוציטים הייתה שלילית, מה שמעיד על היעדר זיהום עם M. bovis.
בדגימות דם מארבע פרות שנטבחו, התגובה הספציפית של תמוגת לויקוציטים הייתה חיובית עם PPD-טוברקולין עבור ציפורים. תמוגה של לויקוציטים בדגימות היה 11%, 20%, 22%, 26%, מה שמצביע על כך שהחיות נדבקו ב-M. avium.
בדגימות דם של ארבע בעלי חיים התקבלה תוצאה חיובית של RLLS עם CAM. אחוז תמוגה של לויקוציטים היה 11%, 13%, 15%, 20%, אשר קשור לזיהום של בעלי חיים במהלך החיים עם מיקובקטריה לא טיפוסית.
לפיכך, הבדיקות שבוצעו של דם עם טוברקולין מחוץ לגוף מבעלי חיים עם בדיקות טוברקולין חיוביות מאפשרות לזהות במהירות את הגורמים האמיתיים שגרמו לרגישות הגוף לטוברקולין, ובעיקר, מאפשרות לשלול את השחיטה הבלתי סבירה. של בעלי חיים פרודוקטיביים ביותר. האפשרות להשתמש בשיטת אבחון חוץ גופית של תגובות טוברקולין לא ספציפיות ישירות בתנאי החווה תתרום ל שימוש נפוץאלרגנים בעלי אופי שונה כאמצעי לאבחנה מבדלת של תגובות טוברקולין ספציפיות ולא ספציפיות.
השיטה המוצעת לאבחון תגובות טוברקולין לא ספציפיות מומלצת לשימוש בחוות ללא שחפת. לשם כך נלקח דם מכל בעלי החיים שנתנו תגובה חיובית למתן תוך עורי של טוברקולין ונבדק מחוץ לגוף עם הטוברקולינים הזמינים, מה שמאפשר לזהות את האטיולוגיה של תגובות טוברקולין הנגרמות על ידי סוגים שונים של מיקובקטריות.
בִּיבּלִיוֹגְרָפִיָה
- Verkhovsky, O.A. ערך אבחוני של תגובות חסינות תאיתבמקרה של שחפת בבקר / O.A. Verkhovsky, A.Kh. ניימנוב, או.א. Savitskaya // בעיות בפועל פתולוגיה זיהומיתואימונולוגיה של בעלי חיים. חומרים של הכנס הבינלאומי המדעי-מעשי מוסקבה, 16-17 במאי, 2006. - מ.; איזוגרף, 2006. - S.180-186.
- דובובה, ב.ל. חדש באבחון מבדל של שחפת של בעלי חיים חקלאיים / ב.ל. Oak, O.N. Solovieva, N.V. אולקו // אוסף מאמרים מדעיים"אבחון, מניעה וטיפול במחלות זיהומיות של חיות משק" - Persianovskiy, 2000. - P.8-12.
- דובובה, ב.ל. מחקרים על הספציפיות והפעילות של RSLL באבחון שחפת בבקר / B.L. Dubovoy, O.N. פוליאקובה // נתיב פיתוח חדשני של המכלול האגרו-תעשייתי - הכיוון העיקרי של מחקר מדעי לחקלאות. - פרסיאנובסקי, 2007. - S.67-69.
- ניימנוב, א.ח. הבחנה בין תגובות אלרגיות לטוברקולין / A.Kh. ניימנוב // וטרינרי. - 2002. - מס' 3.- S.10-12.
- הדרכה לביצוע בדיקה בו-זמנית עם שימוש באלרגן קומפלקס טוברקולין ממיקובקטריה לא טיפוסית (AM) באבחון של שחפת בבעלי חיים. חקיקה וטרינרית. ת' 3, מ': "ספייק", 1981.- S.220-224
- בקרה אפיזוטולוגית ואבחון של שחפת בבעלי חיים סוגים שונים. מניעה ובקרה של מחלות זיהומיות הנפוצות לבני אדם ובעלי חיים. אוסף של סניטריים ו תקנות וטרינריות. אד. רשמי. Goskomsanepidnadzor מרוסיה. משרד החקלאות של רוסיה. מוסקבה, 1996.- ס' 164 - 167.
תַקצִיר
יש צורך בשיטות רגישות יותר כדי לזהות את האטיולוגיה של התהליך האלרגי בשחפת. כדי לקבוע את האטיולוגיה של תגובות טוברקולין לא ספציפיות בחוות משגשגות, השתמשנו ב-PPD-טוברקולין לציפורים וב-KAM מחוץ לגוף עם דם של בעלי חיים המגיבים לטוברקולין עבור יונקים. הוכח שניתן להשתמש ב-RSLL כדי להבדיל בין תגובות ספציפיות ולא ספציפיות לטוברקולין.
מילות מפתח:אבחון, שחפת, תגובת תמונת לויקוציטים ספציפית (RLLL).
UDC 619.616.002.5
אבחון של תגובות לא ספציפיות לטוברקולין הנגרמות על ידי מיקובקטריות ATYPICAL ו-AVIAN MYCOBACTERIES Dubovoi B.L., Polyakova O.N. סיכום
נדרשות שיטות רגישות יותר שיכולות לזהות את האטיולוגיה של תהליך אלרגי בשחפת. PPD-טוברקולין לציפורים ו-CAM מחוץ לגוף עם דם של בעלי חיים, המגיבים לטוברקולין עבור יונקים, שימשו לקביעת האטיולוגיה של תגובות טוברקולין לא ספציפיות בכלכלות עשירות. זה מבוסס שה-RSLL יכול לשמש להבדלה של תגובות ספציפיות ולא ספציפיות לשחפת.
מילות מפתח:אבחון, שחפת, תגובה של תמוגה ספציפית של לויקוציטים (RSLL).
על המחברים
Dubovoy Boris L. - D. Sc. ברפואה וטרינרית, פרופסור, ראש מחלות זיהומיות של חיות חקלאיות ומעבדת מחקר עופות של הממסד המדעי הממלכתי "מכון מחקר וטרינרי אזורי צפון קווקזי" של האקדמיה הרוסית למדעי החקלאות; 6/4. רח' Veterinarnaya, נובוצ'רקאסק, אזור רוסטוב, 394400; טל' 89281360864.
אחראית להתכתבות עם מערכת: Polyakova Olga N.- סטודנטית לתואר שני של הממסד המדעי הממלכתי "מכון מחקר וטרינרי אזורי צפון קווקזי" של האקדמיה הרוסית למדעי החקלאות; 28, Sadovaya St., Novocherkassk, אזור רוסטוב, 394406; טל' 89287549422
Dubovoy Boris Lavrentievich, דוקטור למדעי הוטרינריה, פרופסור, ראש המעבדה לחקר מחלות זיהומיות של חיות משק ועופות של המוסד המדעי הממלכתי "מכון וטרינרי אזור צפון קווקז" של האקדמיה הרוסית למדעי החקלאות; 394400, אזור רוסטוב, נובוצ'רקסק, st. וטרינרי, ד.4, kv.6; טל': 89281360864.
אחראי על ההתכתבות עם העורך: פוליאקובה אולגה ניקולייבנה, סטודנטית לתואר שני של המוסד המדעי הממלכתי "המכון הווטרינרי למחקר אזורי צפון קווקז" של האקדמיה הרוסית למדעי החקלאות; 394406, אזור רוסטוב, נובוצ'רקסק, st. סדובאיה, ד.28; טל': 89287549422.
גודל גופן
מניעה ואבחון מעבדתי של ברוצלוזיס אנושי - הוראות מתודולוגיות - MU 3-1-7-1189-03 (אושר על ידי המדינה הראשית ... בפועל בשנת 2018
5.3.2. תגובת תמוגה לויקוציטים
הכנסת אנטיגן ספציפי לאורגניזם בעל רגישות אינה אדישה לנושא. בהקשר זה, ראוי לציון שיטה יעילהזיהוי של רגישות יתר מסוג מושהה על ידי שיטת חוץ גופית תוך שימוש בתגובת לויקוציטים (RLL). RLL מבוסס על התחשבות בהרס של לויקוציטים של אורגניזם בעל רגישות תחת השפעת אנטיגן ספציפי, הרשום בשיטת חוץ גופית. ל-RLL יש ספציפיות קפדנית, מאפשרת לכמת את מידת הרגישות של הגוף, ומאפשרת לקבל תשובה 3-4 שעות לאחר נטילת הדם.
טכניקת הגדרת RLL.
RLL מתבצע במבחנות העשויות מזכוכית טהורה מבחינה כימית. כאנטיגן, משתמשים בתרחיף של ברוצלה שנרצחה בחום (ניתן להשתמש בזן החיסון B.abortus 19BA) ב
7 ריכוזים 1 x 10 µl/ml.
דם למחקר נלקח בכמות של 1 מ"ל ומוכנס לבקבוקון עם הפרין בשיעור של 75-80 IU של הפרין לכל 1 מ"ל דם. 0.4 מ"ל של דם בהפרין מונח ב-2 מבחנות. 0.1 מ"ל של אנטיגן ברוצלוזיס מתווסף לצינור הראשון (צינור ניסוי), לשני - 0.1 מ"ל של מי מלח כדי לבסס תמוגה לא ספציפית של לויקוציטים (צינור בקרה). המבחנות מנערות במשך 2-3 דקות, ולאחר מכן ספירת הלויקוציטים מתבצעת בתא Goryaev לפי השיטה המקובלת בהמטולוגיה. לאחר מכן, המבחנות ממוקמות בתרמוסטט למשך שעתיים ב-37 מעלות צלזיוס ומנערות מעת לעת לאחר 15-20 דקות. לאחר הדגירה, הצינורות מנערים שוב למשך 2-3 דקות. ולספור לויקוציטים. הספירה מתבצעת לפחות 2 - 3 פעמים עבור כל צינור, ולאחר מכן המספר הממוצע שלהם מוצג. נוכחות לויקוציטים לאחר הדגירה בצינורות הניסוי והביקורת מחושבת לפי הנוסחה: מספר הלויקוציטים לאחר הדגירה x 100% מספר הלויקוציטים לפני הדגירה.
מדד הליקוציטים הספציפיים (PSL) מחושב על ידי קביעת ההפרש - אחוז הירידה בלויקוציטים במבחנה פחות אחוז הירידה בלויקוציטים בבקרה. PSL מבוטא כערך שלילי ונע בין -10 ל-30%. PSL פחות מ-10% מצביע על תמוגה לא ספציפית.
דרישות
לפיתוח מחקרים ניסיוניים כדי להצדיק את הריכוזים המקסימליים המותרים של אלרגנים כימיים תעשייתיים באוויר של אזור העבודה והאטמוספירה
הוראות מתודולוגיות
MU 1.1.578-96
1. פותח על ידי מכון המחקר לרפואה תעסוקתית של האקדמיה הרוסית למדעי הרפואה (Dueva L.L., Alekseeva O.G.), מכון המחקר לאקולוגיה והיגיינה של האדם סביבה RAMS (Pinigin M.A., Tepikina L.A.), המכון לאימונולוגיה של משרד הבריאות והתעשייה הרפואית של רוסיה (Chernousov A.D.), המכון המרכזי לדרמטונרולוגי של משרד הבריאות והתעשייה הרפואית של רוסיה (Umerov Zh.G.), St. מכון המחקר של פטרבורג לבריאות תעסוקתית ומחלות תעסוקתיות של משרד הבריאות והתעשייה הרפואית ברוסיה (Sidorin G.I., Martinson T.G.), המכון הסניטרי וההיגייני למחקר בלארוס (Shevlyakov V.V.), מכון המחקר של חרקוב לבריאות תעסוקתית ומחלות תעסוקה (Vasilenko N.M.) , מעבדת המחקר המרכזית לטבית האקדמיה לרפואה(Ivanova I.A.).
2. אושר והוכנס לתוקף על ידי סגן יו"ר ראשון של הוועדה הממלכתית לפיקוח תברואתי ואפידמיולוגי של רוסיה - סגן רופא תברואתי המדינה הראשי הפדרציה הרוסית S.V. Semenov 21 באוקטובר 1996
3. הוצג במקום ההמלצות המתודולוגיות "ארגון מחקרים על ויסות היגייני של אלרגנים תעשייתיים באוויר אזור העבודה" (1980) ובנוסף ל"הנחיות זמניות לביסוס הריכוזים המרביים המותרים של מזהמים ב. אוויר אטמוספריאזורים מאוכלסים" (1989).
^ 1 אזור שימוש
ההנחיות מיועדות לטוקסיקולוגים העוסקים בביסוס תקני ההיגיינה לחומרים מזיקים באוויר אזור העבודה והאטמוספרה. הנחיות מוקדשות לקביעת סטנדרטים היגייניים לאלרגנים כימיים תעשייתיים באוויר אזור העבודה והאווירה. יותר מעשור של תרגול בביסוס תקני היגיינה (מגבלות ריכוז מרבי והנעלה) עבור אלרגנים תעשייתיים באוויר אישר את היעילות של אמצעי זה למניעת התפתחות מחלות אלרגיותעובדים בתעשיות אלרגניות ואוכלוסיית אזורי התעשייה. אמיתי הנחיותהתפתח תוך התחשבות בנתונים שהצטברו במהלך השנים על התיאוריה והפרקטיקה של אלרגולוגיה טוקסיקולוגית. במקביל, ניתנת גישה מאוחדת להצדקת תקני היגייני לאלרגנים כימיים תעשייתיים באוויר של אזור העבודה והאווירה.
הערכת סיכון לאלרגיה בעת קביעת סטנדרטים היגייניים לתרכובות כימיות ו מוצרים מורכביםבהתבסס עליהם, חובה לבצע במקרים הבאים:
בעת קיצוב תרכובות כימיות חדשות השייכות למעמדות כימיים שלא נחקרו במונחים של אלרגולוגיה;
כאשר קיצוב תרכובות כימיות ומוצרים מורכבים השייכים למעמדות כימיים המכילים אלרגנים ידועים כבר, או שיש אנלוגים כימיים, שיש להם אפקט רגיש;
אם יש לך תלונות אלרגיות או סימנים קלינייםנגעים אלרגיים באנשים הבאים במגע עם תרכובת או מוצר כימיים אלו.
^ 2. תכנית מערך המחקר
המחקר מתבצע בשני שלבים. מטרת השלב הראשון היא לזהות את התכונות האלרגניות של החומר הנבדק, השלב השני הוא להצדיק את ערכו של התקן ההיגייני (ראה תרשים).
בשלב הראשון של המחקר, נעשה שימוש בשיטות של רגישות מפורשת של שפני ניסיונות ועכברים.
^ תכנית מערך המחקר
שלב I - זיהוי תכונות אלרגניות
שלב ב' - הצדקת ערך התקן הסניטרי
א נורמליזציה באנלוגיה
^ ב. קיצוב לפי הסכימה המואצת והשלמה
כאשר לומדים תרכובות כימיות פשוטות, מומלץ להשתמש בשיטה של רגישות של חזירי ניסיונות תוך עורית לאזור האוזן ו/או רבייה של רגישות יתר מסוג מושהה (להלן מכונה DTH) בעכברים.
הרגישות של חזירי ניסיונות, כמין הרגיש ביותר של חיות מעבדה לפעולת אלרגנים כימיים, מאפשרת להעריך את הפעילות האלרגנית של החומר הנחקר. לשם כך, בעלי חיים עוברים רגישות על ידי החדרת שתי מנות של החומר לאזור האוזן: 50 ו-200 מיקרוגרם/חיה. רבייה של HRT בעכברים מאפשרת לחשוף את התכונות האלרגניות של לא רק חומרים מסיסים מסיסים, אלא גם בלתי מסיסים במים, עם פעילות אלרגנית חזקה או מתונה. מכיוון שהחדרת אלרגנים חלשים לעכברים אינה מתבטאת בפיתוח של HRT מוגדר היטב, אם התוצאה של ניסוי זה על עכברים היא שלילית או מפוקפקת, חזירי ניסיונות צריכים לעבור רגישות נוספת במינון של 200 מיקרוגרם/חיה. יחד עם זאת, כמו גם עבור חומרים בעלי פעילות אלרגנית חלשה לכאורה, השימוש במינון רגישות גבוה עוד יותר של 500 מיקרוגרם/חיה אינו נכלל. כאשר לומדים מוצרים פולימריים מורכבים ולא נרפאים, מתבצעת רגישות משולבת של חזירי ניסיונות (לעור האוזן ובנוסף בצורה אפקוטנית) ו/או משתמשים בשיטה להתרבות HRT בעכברים.
בנוסף לשיטות מחקר חובה אלו של השלב הראשון, ניתן להשתמש גם בשיטות אחרות של רגישות לבעלי חיים על פי האינדיקציות הרלוונטיות. אז, במחקר של תרכובות ומוצרים כימיים, במיוחד דביקים וצמיגים, מזהמים עורעובדים, רצוי לבדוק את האפשרות לפתח אלרגיות מגע בשיטה של ריבוי יישומים אפיקוטיים על חזירי ניסיונות. לאבק תעשייתי בלתי מסיס במים שכבר דלוק שלב א'ניתן ליישם מחקרים על השיטה של רגישות תוך קנה הנשימה של חולדות לבנות.
אם המאפיינים האלרגניים של החומר הנחקר לא מתגלים בשלב הראשון של המחקר, אז הוא מנורמל כחומר של פעולה רעילה כללית. אם לפחות אחת משיטות הרגישות אפשרה לזהות את התכונות האלרגניות של החומר הנחקר, אזי יש לבצע את השלב השני של המחקר.
שלב II של המחקר, בהתאם לשיטת הרגולציה (באנלוגיה, תכנית מואצת או מלאה), כולל את הניסויים הטוקסיקולוגיים-אלרגולוגיים הבאים.
כאשר מנרמל באנלוגיה, מתבצעת השוואה של חומרת ותדירות הרגישות בבעלי חיים הנגרמת על ידי החדרת אלרגן ייחוס והחומר הנבדק, תוך שימוש בשיטות של רגישות מפורשת של השלב הראשון. כאשר מנרמל אבק בלתי מסיס, ניתן גם להשתמש ברגישות תוך קנה הנשימה של חולדות לבנות. עבור תרכובות כימיות פשוטות, האלרגן הייחוס הוא כבר חומר מנורמל, הדומה במבנה הכימי שלו ומכיל את אותם חומרים פעילים האחראים להתפתחות הרגישות. קבוצות כימיות. האלרגן הייחוס להרכב מורכב הוא כבר הרכב מנורמל, דומה בהרכבו ומכיל את אותו מרכיב האחראי על התפתחות הרגישות.
בהיעדר אלרגן ייחוס, השלב השני של המחקר כולל קביעה ניסויית של ספי רגישות: בשאיפה אחת של החומר - Lim sens אֵס, עם שאיפות מרובות - Lim sens ch. השוואת ערכים Lim sens אֵסו Lim sens chעם Lim אֵסו Lim ch, שהוקם בניסויים טוקסיקולוגיים על השפעות אינטגרליות וספציפיות, מאפשר לך לקבוע אם השפעת הרגישות מגבילה. בהתחשב בנתונים אלו, ערכו של תקן ההיגיינה מוצדק (ראה סעיף 6).
בעת קיצוב מוצרים כימיים מורכבים, רגישות של בעלי חיים בשני שלבי המחקר מתבצעת עם מוצר שלם; אם מתגלה רגישות, כל המרכיבים העיקריים בצורתם הטהורה משמשים לבדיקה, ואם הרכב אינו ידוע, המוצר כולו או התמצית ממנו (ראה סעיף 5.3).
^ 3. הקמת מחקר לזיהוי תכונות אלרגניות
3.1. רגישות תוך עורית של חזירי ניסיונות
בניסוי משתמשים בשפני ניסיונות צעירים במשקל 250-300 גרם, המחולקים ל-2 קבוצת ביקורת כללית אחת של 8-10 חיות כל אחת. בעלי חיים מקבוצות ניסוי עוברות רגישות על ידי החדרת פעם אחת לתוך העור של פני השטח החיצוניים של האוזן קרוב יותר לבסיס שלה 50 (קבוצת ניסוי ראשונה) ו-200 מיקרוגרם לכל בעל חיים (קבוצת ניסוי שנייה) של החומר הנבדק בנפח של 0.02 - 0.1 מ"ל. מים מזוקקים, מי מלח פיזיולוגי, אצטון, אלכוהול, tween-80, דימתיל סולפוקסיד וכו' משמשים כממיסים. תחליבים מימיים משמשים בעת לימוד מוצרים שמנים, ותמציות משמשות לפולימרים נרפאים (ראה סעיף 5.3). חיות בקרה מוזרקות עם אותו נפח של ממס, מתחלב או נוזל מיצוי.
זיהוי של רגישות (ראה סעיף 5) מתבצע לאחר 8 עד 10 ימים. אלרגנים חזקים בשתי המינונים גורמים לרגישות בולטת בחזירי ים: אינדיקטור הקבוצה הממוצע של בדיקות אלרגולוגיות שונה באופן מובהק סטטיסטית מזה של חיות ביקורת. אלרגנים בינוניים גורמים לרגישות בולטת רק כאשר ניתנים במינון של 200 מיקרוגרם לבעל חיים, וכאשר ניתנים במינון של 50 מיקרוגרם לכל חיה - חלשה, שבה נמצא רגישות ב-1/3 - 1/2 מהחיות, וה אינדיקטורים קבוצתיים ממוצעים של בדיקות אלרגולוגיות עשויים שלא להיות שונים מאלו של חיות ביקורת. אלרגנים חלשים גורמים לרגישות חלשה רק כאשר החומר ניתן במינון של 200 מיקרוגרם לבעל חיים, בעוד שרק בדיקות עם תאי דם יכולות להיות חיוביות, ובדיקות עור יכולות להיות שליליות.
^ 3.2. רגישות משולבת של שפני ניסיונות
מוצרים מורכבים ופולימרים מוכחים יכולים להיספג בצורה גרועה מאוד, ובמקרה זה לא מתרחשת רגישות בחזירי ניסיונות אפילו ב-200 מיקרוגרם/עור אוזן חי. לקבלת ההחלטה הסופית על נוכחות של תכונות אלרגניות במקרה של תוצאות שליליות של בדיקות אלרגולוגיות של בעלי חיים, יישומים אפקוטניים של החומר מתחילים למחרת. לאחר היישום השביעי, חזירי הים נבדקים שוב.
ריכוז החומר עבור יישומים אפיקוטיים נבחר בתהליך של לימוד השפעת גירוי העור או בניסוי מיוחד: 6 - 8 שפני ניסיונות במשקל 250 - 300 גרם למשך 7 - 10 ימים (5 פעמים בשבוע) מורחים 3 טיפות של החומר הנבדק והדילולים שלו 1:2, 1:10 ו-1:100 על "חלונות" קצוצים של פני השטח הצדדיים של הגוף בגודל של 2X2 ס"מ. כממס, נוח להשתמש בממס נדיף. אינו מגרה את העור (אצטון, אלכוהול 70 מעלות, דימתיל סולפוקסיד). אם נוצר סרט, הוא נשטף לאחר 4 שעות, במקרים אחרים העור אינו מטופל בכלום. מכינים משחות מחומרים בלתי מסיסים (רצוי על לנולין, ולא על ג'לי נפט), המופצות בעזרת מרית עין על פני ה"חלון". עבור רגישות, בחר את הריכוז המרבי שלא גרם להתפתחות של דרמטיטיס מגע.
^ 3.3. קביעת HRT בעכברים
בקבוצות הניסוי והביקורת לוקחים 10 עכברים של קו טהור (BALB / C, CA-1, DVA / 2) או 16 - 20 עכברים גזעיים במשקל 18 - 20 גרם בסיס זנב. מינון הרגישות של החומר מתחלב ב-60 µl של תערובת של אדג'ובנט מלא של פרוינד (CAF) ותמיסת האנק pH 7.5, שהוכנה ביחס של 1:1. הרכב PAF: 1 מ"ל לנולין, 3 מ"ל שמן וזלין, חיסון BCG מומת בחום 5 מ"ג. לנפח זה של PAF, הוסף 50 μl של Tween-20 ו-0.5 מ"ל מים מזוקקים. התערובת עוברת חיטוי. חיות בקרה מוזרקות עם 60 μl של תערובת זו ללא תוספת של חומר הבדיקה.
כדי לזהות רגישות לאחר 5 ימים, אותה כמות של החומר הנחקר (10 מ"מ או 100 מיקרוגרם) המומס (מורח) בתמיסה של האנק מוזרקת לתוך כרית הכף האחורית של עכברים כמו במהלך הרגישות. לאחר 24 שעות, מדוד את העובי של שניהם רגליים אחוריותבמ"מ. על כמות הבצקת, כלומר. התפתחות DTH נשפטת לפי ההבדל בעובי של שתי הרגליים האחוריות (מדד DTH). בחיות בקרה, זה בדרך כלל 0.04 - 0.09 מ"מ. עודף מובהק סטטיסטית של HRT הקבוצה הממוצעת של חיות ניסוי בהשוואה לבקרות מצביע על נוכחות של תכונות רגישות בולטות או מתונות בתרכובת הנחקרת.
^ 3.4. יישומים אפקוטניים מרובים על חזירי ים
בחירת ריכוז הרגישות מתבצעת באותו אופן כמו עבור רגישות משולבת (ראה סעיף 3.2). יישומים אפקוטניים מבוצעים 5 פעמים בשבוע למשך 4 שבועות (20 יישומים בסך הכל). אם בשבוע ה-2-3 של הניסוי, חזירי ניסיונות מראים סימנים של דרמטיטיס מגע, אזי ממשיכים ביישום רגישות באזור אחר של העור. זיהוי רגישות מתבצע 1-2 ימים לאחר היישום האחרון. במקרה זה, מבוצעת בדיקת טיפת עור בצד הנגדי.
^ 4. הקמת מחקר להצדקת ערכם של תקני היגיינה
4.1. רגישות תוך קנה הנשימה של חולדות לבנות
שתי קבוצות של חולדות לבנות ניתנות פעם אחת לתוך קנה הנשימה 0.5 - 1.0 מ"ל של תרחיף של האבק הנחקר הכתוש ביותר במינונים של 50 ו- 10 מ"ג בתמיסה פיזיולוגית מחוממת ל-37 מעלות צלזיוס. חיות מקבוצת הביקורת מוזרקות עם 1 מ"ל של תמיסת מלח מחוממת עד 37 מעלות צלזיוס.
הליך ההחדרה נעשה בצורה הטובה ביותר ללא הרדמה. כדי לעשות זאת, החולדה מקובעת במצב אנכי, מוזרק לתוך חלל פהבדיקה מתכתית המחוברת למזרק עם מינון מתאים של תרחיף מועברת לאורך הדופן הקדמית של הגרון דרך הגלוטיס (יש תחושה של מכשול) עד שהיא נעצרת בהתפצלות קנה הנשימה, הגשש מורם מעט והחדרה מתבצע. לאחר המתן, החיה נשמרת במצב זקוף למספר תנועות נשימה. במקביל, צפצופים וקול חריכה מאשרים את חדירת המתלה לריאות.
בדיקה של בעלי חיים מכל הקבוצות מתבצעת 5 ימים לאחר מתן תוך קנה הנשימה.
^ 4.2. חשיפה לשאיפה בודדת
שאיפות בודדות של חומר על מנת לקבוע את הערך Lim sens acרצוי לבצע על חזירי ניסיונות או חולדות לבנות לאחר מציאת הערך Lim אֵס. לאלרגנים חלשים ובינוניים, די בדרך כלל לבצע שאיפות של החומר הנחקר בריכוזים ברמת הפעיל, הסף ובסדר גודל נמוך מזה של ההשפעה הרעילה הכללית. כאשר לומדים אלרגנים חזקים, עדיין יש צורך לבצע שאיפות בריכוזים נמוכים יותר. משך כל שאיפה הוא 4 שעות לאוויר אזור העבודה ו-24 שעות לאוויר האטמוספרי. מספר החיות בקבוצה חייב להיות לפחות 10.
יש לבצע שאיפות בודדות בחולדות כדי שניתן יהיה להשוות ערכים Lim sens acו Lim אֵסמתקבל על אותו מין בעל חיים. עם זאת, אם שאיפה בודדת אינה גורמת לרגישות בחולדות, יש לחזור עליה בחזירי ניסיונות.
זיהוי רגישות מתבצע שבוע לאחר השאיפה.
לְכָל Lim sens acלקחת ריכוז של החומר, שאיפה בודדת שלו גורמת לרגישות אצל 2 עד 5 מתוך 10 בעלי חיים, המתבטאת בבדיקות מעבדה חיוביות ו/או בדיקות פרובוקטיביות. יחד עם זאת, ערכי הקבוצה הממוצעים של מדדי רגישות עשויים שלא להיות שונים באופן מובהק סטטיסטית מאלו הביקורת.
^ 4.3. חשיפה מרובה לשאיפה
שאיפות מרובות מבוצעות על בעלי חיים מאותו המין שעליהם Lim sens ac. משך החשיפה הוא: בעת הגדרת MPC באוויר אזור העבודה 4 שעות מדי יום 5 פעמים בשבוע למשך שבועיים, עבור MPC באוויר האטמוספרי 14 ימים של חשיפה רציפה (סביב לשעון). בהתאם לכך, לאחר שבועיים, מתבצעת הבדיקה הראשונה של בעלי חיים. במקרה של תוצאה שלילית או מפוקפקת, השאיפה נמשכת עוד שבועיים ומבצעים אותו משטר ובדיקה חוזרת. בעת הקמת ה-MPC באוויר של אזור העבודה, משך החשיפה הכולל לא יעלה על חודש אחד, ועבור אוויר אטמוספרי ניתן להמשיך בניסוי עד חודשיים. חשיפה ארוכה יותר אינה מעשית, מכיוון שהיא אינה מובילה לעלייה באפקט הרגיש. יתרה מכך, שאיפות עוקבות עלולות להוביל להיחלשות ההשפעה עקב התפתחות תהליכים חיסוניים מפצים ולהקשות על קביעת ריכוז הסף. לפיכך, ההשפעה של ניסוי של 2-4 שבועות שווה ביסודה לניסוי טוקסיקולוגי כרוני, מה שמאפשר להשוות בין הערכים Lim chו Lim sens ch .
קביעת ריכוז הסף על ידי אפקט הרגישות ( Lim sens ch) מתבצע על פי אותם עקרונות כמו בחשיפה אחת לאינהלציה.
^ 5. שיטות לגילוי רגישות
מסמך זה ממליץ על בדיקות נרחבות בטכניקות תרגול טוקסיקולוגי לזיהוי רגישות ל תרכובות כימיותומוצרים: בדיקות עור פרובוקטיביות ובדיקות אלרגוט ספציפיות למעבדה המבוססות על תגובה של תאי דם לאלרגן במבחנה. בדיקות אלו יכולות לזהות תגובות אלרגיות סוג אחר: מושהה (בדיקת עור טיפה פרובוקטיבית), סוג ריאגיני מיידי (בדיקות תאי פיטום), כמו גם בתיווך קומפלקסים של מערכת החיסון (תמוגגת לויקוציטים ובדיקות נויטרופילים בדם). הבדיקות המומלצות אינן צריכות להגביל את יוזמת המחקר, שכן לגיטימי להשתמש בשיטות אחרות, הן אבחון אלרגודי ספציפי והן לא ספציפיות, המעידות על התפתחות רגישות בחיות ניסוי (אימונולוגיות, ביוכימיות, אימונומורפולוגיות וכו').
^ 5.1. בדיקת טיפת עור פרובוקטיבית בחזירי ניסיונות
כדי לבצע בדיקת טיפת עור (להלן CP), ריכוז הבדיקה והחומר הנבדק נבחרים מראש על קבוצה של שפני ניסיונות שלמים (6-8 פרטים). לשם כך, על המשטחים הצדדיים של גוף החיה, השיער נחתך ב-4 - 8 חלקים בגודל 1 x 1 ס"מ, מופרדים על ידי רצועות צמר. יש למרוח 1-3 טיפות מהחומר בריכוז מסוים על האזור המתאים. בדרך כלל, החומר נבדק בצורתו המקורית ובדילולו פי שניים או פי עשרה. מים, אלכוהול 70 מעלות, אצטון, דימתיל סולפוקסיד משמשים כממס (מדלל). במקרה זה, אחד מאזורי העור צריך להיות בקרה, עליו מוחל הממס המתאים (מדלל). התגובה נלקחת בחשבון חזותית לאחר 24 שעות.
כריכוז בדיקה, נבחר המקסימום, שהמריחה שלו על עורם של חזירי ים שלמים אינה גורמת לתגובת גירוי (אריתמה, נפיחות) לאחר 24 שעות.
הגדרת CP. על עור נטול שיער של צדי חזירי ניסיונות (ניסוי ובקרה) יש למרוח טיפה אחת של החומר הנבדק בריכוז בדיקה. התגובה מוערכת חזותית לאחר 24 שעות לפי הסולם הבא:
0 נקודות - אין תגובה נראית לעין;
נקודה אחת - אריתמה ורודה מעט בכל האזור או לאורך הפריפריה;
2 נקודות - אריתמה ורודה בהירה בכל האזור או לאורך הפריפריה;
3 נקודות - אריתמה אדומה בוהקת בכל האזור;
4 נקודות - נפיחות בעור עם או בלי אריתמה;
5 נקודות - נפיחות קשה, כיב מוקד, דימום.
^ 5.2. בדיקת נפיחות אוזניים פרובוקטיבית
בחירת ריכוז הבדיקה ל-TOU אינה שונה עקרונית מזו של CP: משתמשים באותם ממיסים (אצטון, 70% אלכוהול) ודילולים של החומר (מ-0.1 עד 20%, לעתים רחוקות יותר 50% או מוצר לא מדולל) . עם זאת, מספר החיות הכולל גדל מכיוון שניתן לבדוק רק שני ריכוזים (אחד בכל אוזן) לכל חיה.
הגדרת TOU: יש למדוד מראש את עובי החלק האמצעי במיקרומטר במ"מ אֲפַרכֶּסֶת, ואז בשני המשטחים השליש האמצעישל האוזן מיושרות ומקובעות בפינצטה, מרחו 25 μl מהחומר הנבדק בריכוז עבודה. לאחר 24 שעות, עובי האוזן נמדד מחדש וערך TOU מחושב מההבדל בעובי לפני ואחרי המריחה. TOU נחשב חיובי בחזירי ניסיונות וחולדות עם אינדיקטור של 0.03 מ"מ או יותר, בעכברים - 0.01 מ"מ או יותר. בשפני ניסיונות, TOU ניתן לציון בסולם הבא:
0 נקודות - עד 0.03 מ"מ;
נקודה אחת - 0.03 - 0.07 מ"מ;
2 נקודות - 0.08 - 0.12 מ"מ;
3 נקודות - 0.13 - 0.17 מ"מ;
4 נקודות - 0.18 - 0.22 מ"מ;
5 נקודות - 0.23 מ"מ או יותר.
^ 5.3. בחירת מינוני עבודה של חומר לקביעת אלרגוטסטים ספציפיים עם תאי דם של בעלי חיים
בדיקות אלרגוטס ספציפיות עם תאי דם, ככלל, מבוצעות עם 0.1 - 0.01% פתרונות (בתמיסת מלח), כך שהם יכולים להשתמש בחומרים מסיסים גרועים. עבור חומרים שאינם מסיסים במים גם בריכוזים כאלה, יש לבחור חומר מסיס במים עם דטרמיננט אנטיגני קבוצתי: למשל, למוצרי פולימר המכילים פורמלדהיד, תמיסות פורמלדהיד; למוצרי פולימר המכילים קבוצות אפוקסי - אפיכלורוהידרין; עבור כל תרכובות הכרום - CrCl 3; עבור מתכת Be ותרכובותיה - בריליום גופרתי וכו'. כאשר לומדים פולימרים מרפאים, משתמשים בתמצית: החומר הנבדק ומלוחים ביחס של 1:1 לפילמור ו-1:10 למוצרי פולי עיבוי במהלך דגירה ב-37 מעלות צלזיוס למשך 3-5 ימים.
רצוי להכין פתרונות לא ממוצרים טכניים, אלא מחומרים טהורים מבחינה כימית. מכיוון שסביבה חומצית או בסיסית עלולה לגרום נזק לתאי הדם, יש להקפיד שה-pH של תמיסת העבודה יהיה ניטרלי או מעט בסיסי (pH 7.2 - 7.4). אם החומר יוצר תמיסה לא יציבה, יש להכין תמיסות עבודה לכל ניסוי. ניתן לאחסן תמיסות מתמידות במקרר למשך חודש, אולם יש לעקוב אחר הסטריליות שלהן ובמקרה של עכירות או היווצרות סרט לא ניתן להשתמש בתמיסה.
מינוני עבודה (ריכוזי תמיסות) של חומרי הבדיקה נבחרים על ידי ביצוע בדיקה עם דם של בעלי חיים שלמים באמצעות מספר דילולים. כדי לזהות רגישות, נבחר הריכוז המרבי של התמיסה שאינו גורם לעלייה בתמוגה או שינויים אחרים בתאי הדם התואמים לבדיקה בהשוואה לדגימת ביקורת בתוספת נוגד קרישה בלבד.
^ 5.4. התגובה של תמוגה ספציפית של לויקוציטים בדם
אפשרות 1. 0.1 מ"ל של תמיסה פיזיולוגית (דגימת בקרה) מוסיפים למבחנה או לבאר הראשונה של הצלחת, מוסיפים 0.1 מ"ל של תמיסה פיזיולוגית, שבה מינון העבודה של החומר הנבדק מומס קודם לכן (דגימה נסיונית), לשני. לאחר מכן, 0.1 מ"ל מדם הבדיקה מתווסף לשתי המבחנות. מערכות התגובה מעורבות בניעור ומודגרות למשך שעתיים ב-37 מעלות צלזיוס. מכל דגימה, דם מועבר ב-0.02 מ"ל, בהתאמה, לשתי מבחנות או בארות של הטבליה המכילות 0.4 מ"ל של תמיסה 3% להרס של אריתרוציטים. תמיסה מימיתחומצה אצטית.
אפשרות 2. דם של חיות ניסוי נאסף בשני מלנג'רים עד לסימן 0.5, לאחר מכן מוסיפים למלנג'ר הראשון עד לסימן 1 תמיסה 5% של נתרן ציטראט שהוכנה במי מלח פיזיולוגי (דגימת ביקורת) (עד אותו סימן I) - תמיסת נתרן ציטראט 5%, שבה מינון העבודה של החומר הנבדק הומס קודם לכן (דגימה נסיונית). המלנגורים מנערים ומודגרים ב-37 מעלות צלזיוס למשך שעתיים. לאחר מכן, בשני המלנגורים, עד לסימון II, מוסיפים תמיסה מימית של חומצה אצטית בגודל 3-5%, בצבע כחול מתילן.
החישוב של המספר המוחלט של לויקוציטים מתבצע בתא ספירת דם או על פיקסקל. בעת שימוש במלנגורים, לפני מילוי החדר, 3-4 טיפות מנוקזות מראש.
מחוון RSLL מחושב על ידי הנוסחה:
התגובה נחשבת חיובית עם שיעור תמוגה של לויקוציטים של 10% או יותר. מחוון RSLL מעל 20% מציין רמה גבוההרגישות לבעלי חיים.
ריכוזי עבודה של אלרגנים כימיים אינם אמורים לגרום לתמוגה של יותר מ-9% מהלוקוציטים של בעלי חיים שלמים ולרוב תואמים לדילול של 0.5 - 0.05% במי מלח; דילולים גבוהים יותר דורשים חומרים בעלי מגרה בולטת, ולכן, השפעה ציטוטוקסית על תאי הדם.
^ 5.5. תגובת נזק ספציפית לנויטרופילים
כדי לבסס את התגובה של נזק ספציפי לנויטרופילים (להלן בדיקת PPN), תמיסת מימית 5% של נתרן ציטראט או תמיסה של 1.5% של EDTA (Chelaton-3) שהוכנה בתמיסת מלח פיזיולוגית משמשת כחומר נוגד קרישה (מוניטור). ה-pH של התמיסה).
ריכוז העבודה של החומר הנחקר מוכן על אותו נוגד קרישה שמתווסף לדם. ריכוז העבודה לא אמור לגרום נזק ליותר מ-4% מהנויטרופילים של בעלי חיים שלמים בגרסה הראשונה של בדיקת PPN ו-7% בגרסה השנייה.
הגדרת מבחן PPN. לתוך צינור הצנטריפוגה הסיליקוני הראשון (דגימת ניסוי) הוסף 0.1 - 0.2 מ"ל של תמיסה של החומר הנבדק בריכוז עבודה, לתוך השני (דגימת ביקורת) - אותו נפח של נוגד קרישה בלבד. לאחר מכן, אותו נפח דם של החיה הנבדקת מתווסף לשתי הצינורות, ולאחר מכן מערבבים בעדינות את הצינורות ונשמרים במשך שעה בטמפרטורת החדר.
אפשרות 1. לאחר סיום הדגירה מכינים משתי המבחנות על שקף זכוכית מריחות בעובי בינוני, המקובעות ומוכתמות בשיטה הנהוגה במריחות צביעה לספירת נוסחת הלויקוציטים. תחת טבילה, נספרים 100 נויטרופילים, תוך התחשבות במספר התאים עם כרומטינוליזה ברורה, פיכנוזה, פיצול גרעיני, היפרכרומטוזיס או קריוליזה.
אפשרות 2. לאחר סיום הדגירה, ערבבו בעדינות שוב והוסיפו לשתי המבחנות 0.02 מ"ל של תמיסת עבודה מימית של אקרידין תפוז (1:20000). פתרון זה נשמר במקרר לא יותר משבועיים. להכנתו משתמשים בתמיסת יוד של תפוז אקרידין בדילול של 1:100, שניתן לאחסן בבקבוק כהה במקרר למשך מספר חודשים. לאחר 5 דקות, 1 טיפה מהתוכן מכל מבחנה מועברת לשתי שקופיות זכוכית, מכוסות בגלישת כיסוי ולאחר 3-5 דקות נבדקת ב- LUMAM עם טבילה. נספרים 100 נויטרופילים, המוגדרים היטב בשל שפע של גרגירי רובי על רקע זוהר ירוק עמום של הציטופלזמה.
נויטרופילים רגילים שלמים הם בצורת אליפסה או עגולה. נויטרופילים פגומים מזוהים על ידי בליטות אמובאידיות אופייניות (תנועתיות מוגברת של תאים) ושינויים מורפולוגיים (קצוות "קרועים" לא אחידים עם הרחקה מתחילה של הציטופלזמה לאורך קצוות התא, ואקווליזציה של הציטופלזמה, דה-גרנולציה, התגבשות דפוס הכרומטין של הגרעין ).
שיעור התגובה מחושב על ידי חלוקה ב-100 של ההבדל במספר הנויטרופילים הפגועים בדגימות הניסוי והביקורת. ערך המדד של 0.05 או יותר בגרסה הראשונה ו-0.08 או יותר בגרסה השנייה מצביע על הרגישות של בעל החיים.
^ 5.6. תגובת דגרנולציה ספציפית תאי תורן
המחקר מבוצע בהרדמה או מיד לאחר עריפת ראש החיה. כדי לעשות זאת, מספריים פותחים את דופן הבטן לאורך קו אמצעיובזהירות (רצוי עם אצבעות בקצות אצבעות גומי, ולא בפינצטה) נשלפת החוצה את הלולאה הארוכה ביותר של המעי הפריסטלטי (5 ס"מ או מעט יותר). הלולאה מונחת על שקופית זכוכית חלופית כך שמתגלים 3 מקטעים גדולים של המזנטריה. לאחר מכן נחתך משני הצדדים קטע מלולאת המעי, ששוליה צריכים להיות תלויים על קצה הכוס ב-0.5 ס"מ. לאחר מכן, מורחים 40 µl של תמיסת מלח על כל מקטע של תכשיר הביקורת הראשון, ו-20 µl של אוטוסרום טרי (הוכן ביום המחקר מדם שנלקח מהווריד ההיאאידי) ו-20 µl של החומר הנבדק בריכוז עבודה מוחלים על כל מקטע של ההכנה הניסיונית השנייה, שהוכן בתמיסת מלח פיזיולוגית. שני ההכנות מודגרות למשך 5 דקות ב-37 מעלות צלזיוס, הפאזה הנוזלית מוסרת על ידי ספיגת קצה הזכוכית המוטה בנייר סינון, ובמידת הצורך, שוב מיישרים את המזנטריה בזהירות. התכשירים נצבעים מיד על ידי הצפתם למשך 1-1.5 דקות בתמיסה 1% של צבע אאוזין מתילן במתיל אלכוהול (לפי מאי-גרונוולד). מסירים את הצבע על ידי שטיפת התכשיר הנוטה מעט במים מפפטה ומשאירים לייבוש מלא באוויר (בדרך כלל 24 שעות). על התכשיר המיובש, מסירים את כל החלק של המעי והמחיצות בין מגזרי המזנטריה בעזרת אזמל.
ההכנות עוברות מיקרוסקופ עם טבילה (הגדלה 10 x 80), 50 תאי תורן נספרים באלכסון, תוך התחשבות בצורות פגומות ביניהם. יש לראות בתאי מאסט עם קרום שבור ושחרור גרגירים מעבר לגבולותיו (דה-גרנולציה), כמו גם פגומים לחלוטין. חשב את האינדיקטור של RDTK לפי הנוסחה:
התגובה נחשבת חיובית בשיעור של 1.31 ומעלה.
ריכוזי עבודה חומרים כימייםעבור RDTC מתאימים לרוב לדילול של 0.01% - 0.001% במי מלח פיזיולוגיים, שתחת פעולתם בחיות בקרה האינדיקטור של RDTC לא יעלה על 1.0 0.3.
^ 5.7. תגובה עקיפה של דה-גרנולציה של תאי פיטום
בדיקה זו (להלן RTDC) מבוססת על התגובה של תאי מטרה (תאי מאסט של חולדה לבנים) לחשיפה חוץ גופית לנוגדנים אלרגיים הכלולים בסרום הדם של חיות ניסוי ולחומר (אלרגן) הנבדק.
כדי להשיג מאגר של תאי פיטום, חולדות לבנות שלמות בהרדמת אתר מוזרקות תוך צפק עם 6-10 מ"ל של מי מלח שחומם עד 37 מעלות צלזיוס, מעורבב עם 0.5 מ"ל הפרין. לאחר עיסוי קל דופן הבטןמספריים מבצעים חתך באורך 1.5-2.2 ס"מ לאורך קו האמצע של הבטן, הופכים את הפגר על פיה ואוספים את האקסודאט הזורם מלולאות המעי לתוך צינור צנטריפוגה הרטובה בהפרין. האקסודאט עובר צנטריפוגה למשך 5 דקות. ב-1500 סל"ד, הסופרנטנט מושלך, והמשקעים מעורבבים לקבלת השעיה של תאי תורן.
לביצוע RNDTK, 0.05 מ"ל של תרחיף תאי פיטום ו-0.05 מ"ל של סרום של החיה הנבדקת מתווספים ל-2 בארות של הטבליה או ל-2 צינורות. לאחר מכן, 0.05 מ"ל של תמיסה פיזיולוגית מתווספת לדגימה הראשונה (ביקורת), 0.05 מ"ל של תמיסה פיזיולוגית מתווספת לדגימה השנייה (ניסיוני), שבה מינון העבודה של החומר הנבדק מומס (0.01 - 0.001% תמיסות , אשר לא אמור לגרום לנזק ספונטני ליותר מ-5% מתאי המטרה). לאחר מכן על שקופית זכוכית חסרת שומן אחת, שהוכתמה בעבר בשני קצוות הזכוכית בצורה של ריבועים, עם 0.3% תמיסת אלכוהולאדום ניטרלי ומיובש בטמפרטורת החדר, מיושם טיפה מכל דגימה. כל טיפה מכוסה בגלישת כיסוי, ששוליה מרוחים בוזלין, ומודגרות ב-37 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות.
ההכנות עוברות מיקרוסקופ בהגדלה של 20 על 80. בכל הכנה סופרים 50 תאי מאסט. החישוב של מחוון RDTC והערכתו מתבצעים כמו בסעיף 5.6 בעת הגדרת ה-RDTC.
^ 5.8. הערכת תוצאות גילוי רגישות
בעת ביצוע מחקרים של השלב הראשון, תדירות התפתחות הרגישות ועוצמתה מוערכת על פי מדדי הקבוצה הממוצעים של כל הבדיקות הפרובוקטיביות והאלרגולוגיות הספציפיות המשומשות. מחלקת הפעילות האלרגנית של החומר הנחקר נקבעת לפי הטבלה. 1: סוג 1 כולל אלרגנים חזקים, סוג 2 - בינוני וכיתה 3 - אלרגנים חלשים. במקרה של הבדל בהשפעה מבחינת תדירות הביטוי של רגישות וערכי מדדי הקבוצה הממוצעים של בדיקות פרובוקטיביות ו/או אלרגולוגיות ספציפיות, הפעילות האלרגנית של החומר מוערכת בהתאם מחוון בולט.
שולחן 1
^ סיווג של חומרים לפי עוצמת הפעילות האלרגנית
| שיטת רגישות | שיעורי פעילות אלרגנית |
|||||
| לפי תדירות התפתחות הרגישות | לפי מהימנות ההבדל בין מדדי הקבוצה הממוצעת בקבוצת הניסוי והביקורת |
|||||
| 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
|
| שרקנים- 200 מק"ג | > 5 מתוך 10 | > 5 מתוך 10 | 5 פאונד מתוך 10 | £0.05 | £0.05 | > 0,05 |
| לתוך עור האוזן 50 מק"ג | > 5 מתוך 10 | 5 מתוך 10 | 0 | £0.05 | > 0,05 | - |
| חזירי ים - משולבים | > 5 מתוך 10 | > 5 מתוך 10 | 5 פאונד מתוך 10 | £0.05 | £0.05 | > 0,05 |
| חזירי ים - עטופים | > 5 מתוך 10 | > 5 מתוך 10 | 5 פאונד מתוך 10 | £0.05 | £0.05 | > 0,05 |
| עכברים - בעור בסיס הזנב | לא לוקחים בחשבון | £0.05 | £0.05 | > 0,05 |
||
כאשר עורכים ניסויי שאיפה בשלב השני של המחקר, הריכוז האפקטיבי נחשב לזה שבפעולתו מתפתחת רגישות בלמעלה ממחצית מהחיות, והמדדים הממוצעים של הקבוצה של בדיקות אלרגולוגיות שונות באופן מובהק סטטיסטית מאלה ב לשלוט בבעלי חיים. עבור הספים של פעולת רגישות חריפה וכרונית, ננקטים ריכוזים שתחת פעולתם (חד או מרובה, בהתאמה) מתפתחת רגישות אצל 2-5 מתוך 10 בעלי חיים, ואינדיקטורים הממוצעים של הקבוצה אינם שונים באופן משמעותי מאלה שבביקורת. חיות.
^ 6. הצדקה לערך תקני היגיינה
ביסוס הערך של התקן הסניטרי של אלרגן כימי תעשייתי במהלך תכנית מלאההמחקר מתחיל בהשוואה Lim sens chעם Lim ch. בהתאם ליחס ביניהם, נקבעים שיטת הביסוס של MPC ונוכחות סימן A (אלרגן).
בעת הקמת ה-MPC באוויר של אזור העבודה, ההוראות הבאות מונחות.
אם רעילות היא הקריטריון המגביל, כלומר. הערכים של ספי הרגישות גבוהים מערכי ספי הרעילות, אז החומר כמעט אינו מסוכן כאלרגן, והוא מנורמל כבעל השפעה רעילה כללית; במקרה זה, הסימן A (אלרגן) אינו מושם.
אם ערכי הסף של ההשפעות הרעילות והרגישות הכלליות אינם שונים באופן משמעותי או שווים, אזי החומר צריך להיחשב כמסוכן מבחינת התפתחות נגעים רעילים ואלרגיים והוא מנורמל בהתאם להשפעה הרעילה הכללית , מלווה בסימון A (אלרגן).
אם הקריטריון המגביל הוא רגישות, כלומר. ספי הרגישות הם מתחת לספי הרעילות, אז החומר מסוכן כגורם אטיולוגי במחלות אלרגיות, הוא נחשב לאלרגן כימי תעשייתי ומנורמל על פי אפקט הרגישות עם הסימן A (אלרגן). במקרה זה, גורם הבטיחות לאלרגן כימי נקבע מתוך טבלה. 2.
שולחן 2
^ גורמי בטיחות קLim sens chבעת הגדרת המכונה באוויר של אזור העבודה
בעת הקמת MPC לחומרים מזיקים בעלי אפקט רגיש באוויר האטמוספרי, מומלצים קריטריונים מחמירים יותר, לאור העובדה שילדים, קשישים ואנשים עם מחלות שונות חשופים לחשיפה. במקרה זה, נלקח בחשבון לא רק ערך הסף של פעולת רגישות כרונית, אלא גם אזור פעולת רגישות כרונית, שנקבע על ידי הנוסחה:
.
יתר על כן, בהתאם לערך ז sens chלקבוע את מקדם הבטיחות ל Lim sens chלפי הטבלה 3 ערך ה-MPC שהושג עבור אפקט הרגישות מושווה ל-MPC עבור ההשפעה הרעילה הכללית, וערך ה-MPC הקטן ביותר נבחר כתקן ההיגייני. סימן A (אלרגן) נקבע בהתאם לעקרונות הביסוס של MPC באוויר של אזור העבודה.
שולחן 3
^ גורמי בטיחות קLim sens chבעת הגדרת ה-MPC באוויר האטמוספרי
אז אם ערכי הספים של כרוני, רעיל ורגישות עולים בקנה אחד והם 0.01 מ"ג/מ"ק, אז ז sens chיהיה שווה ל-1.0. במקרה זה, לפי טבלה. 3, מקדם הבטיחות לאפקט הרגיש לא יכול להיות פחות מ-3.0, וערך ה-MPC יהיה 0.003 מ"ג/מ"ר. אם נקבע מקדם בטיחות של 2.0 לרעילות, כלומר. ערך MPC יהיה 0.005 mg/m 3, מומלץ ערך MPC הנמוך ביותר, כלומר. 0.003 מ"ג למטר 3. אבל אם בדוגמה המנותחת מקדם הבטיחות לרעילות חייב להיות לפחות 5.0, כלומר. הערך שנקבע על ידי השפעה זו יהיה אפילו פחות (0.002 מ"ג / מ"ר), ואז הוא נבחר.
כאשר מבססים את SHEE בשיטה המואצת, כלומר. שטח השפעת הרגישות של החומר מחושב לפי הערך לפי הנוסחה שלהלן וערך ה-SHEV המחושב מההשפעה הרעילה הכללית מופחת כמה פעמים שהוא ז sensac .
.
אז, אם הערך של SHWV מחושב לפי רעילות כמו 0.2 מ"ג / מ"ר, ו ז sens acשווה ל-4, אזי ה-SHEL של החומר הנבדק, בהתחשב בהשפעת הרגישות, יהיה 0.05 מ"ג/מ"ק (0.2:4). סימן A (אלרגן) לשים בהתאם לעקרונות המשמשים בהצדקה של MPC.
כאשר מנרמל באנלוגיה, אם תדירות ועוצמת הרגישות הנגרמת על ידי חומר חופפות לאלה מחשיפה לאלרגן ייחוס, MPC או SHLI מוגדרים ברמה של ערך התקן האלרגני הייחוס המסומן A (אלרגן). עם סטייה משמעותית בתדירות ועוצמת הרגישות בהשוואה לאלו מחשיפה לאלרגן הייחוס, מתבצע שלב II של המחקר וההוראות הנ"ל משמשות להצדקת ה-MPC או SHLI.
דרגת המפגע נקבעת על פי הכללים המקובלים ברעלנות מונעת.
אימות קליני והיגייני של בטיחות ערך ה-MPC שנקבע בניסוי בבעלי חיים מתבצע על ידי השוואת תנאי העבודה ומצב הבריאות של העובדים בשיטות המקובלות ברעלנות מונעת, וכן על בסיס בדיקה אפידמיולוגית ואלרגולוגית של עובדים, כולל בדיקות אימונואלרגולוגיות ספציפיות סלקטיביות על מנת לזהות את התדירות ואת חומרת הרגישות לאלרגן תעשייתי זה.
יישום
(אִינפוֹרמָטִיבִי)
^ מידע ביבליוגרפי
1. הצהרת מחקר על ויסות היגייני של אלרגנים תעשייתיים באוויר אזור העבודה. הנחיותמס' 2121-80 מיום 23/01/1980. משרד הבריאות של ברית המועצות. ריגה, 1980.
2. הנחיות זמניות לביסוס הריכוזים המרביים המותרים של מזהמים באוויר האטמוספרי של אזורים מיושבים מס' 4681-88. משרד הבריאות של ברית המועצות. M, 1989.
3. שיטות לאבחון מעבדתי ספציפי של מחלות אלרגיות תעסוקתיות של אטיולוגיה כימית. הנחיות מס' 10-8 / 94 מיום 25/12/1979 משרד הבריאות של ברית המועצות. M, 1980.
4. Alekseeva O.G., Dueva L.A. אלרגיה לכימיקלים תעשייתיים. מ.: רפואה, 1978. - 242 עמ'.
5. Dueva L.A., Kogan V.Yu., Suvorov S.V., Shterengarts R.Ya. אלרגנים תעשייתיים. M. מרכז לפרויקטים בינלאומיים של הוועדה הממלכתית להגנת הטבע של ברית המועצות. מ', 1989. - 203 עמ'.
ההמצאה מתייחסת לתחום הביוטכנולוגיה. חומר: השיטה כוללת זיהוי של בעלי חיים המגיבים לטוברקולין בחוות משגשגות ובחצרות על ידי בדיקות אלרגיות מתוכננות. מבעלי חיים המגיבים בצורה חיובית לטוברקולין, הדם נבדק על ידי תגובת לויקוציטים ספציפיים (RSLL) באמצעות PPD ליונקים, PPD לציפורים ו-CAM כדיאגנוסטיקום לטוברקולינים. השיטה מאפשרת להבדיל בין תגובות חיוביות ספציפיות ולא ספציפיות לבדיקת שחפת ולאבחן שחפת על בשלב מוקדםמחלות. 4 ו.פ. f-ly, 7 כרטיסיות.
ההמצאה מתייחסת לרפואה וטרינרית, בפרט לשיטות ביטוי לאבחון מבדל של שחפת הנגרמת על ידי סוגים שונים של מיקובקטריה.
ידוע כי בחוות משגשגות, האבחנה העיקרית לשחפת נקבעת בצורה מורכבת - אפיזוטולוגית, קלינית, אלרגית, פתולוגית ומעבדתית (1.)
שיטות האבחון המפורטות במקרים רבים אינן מאפשרות לבצע אבחנה סופית של שחפת תוך זמן קצר.
בדיקות אלרגיות משמשות לבדיקת המוני in vivo לאיתור שחפת. מדגם אבחון(2). עם זאת, הופעת תגובות לא ספציפיות המוניות לטוברקולין בבעלי חיים לא שחפתים אינה מאפשרת לאבחן שחפת בחוות משגשגות על סמך בדיקת טוברקולין חיובית (1; 2).
כדי להבדיל בין תגובות טוברקולין לא ספציפיות, מבוצעת בדיקה סימולטנית (אב-טיפוס) עם שני אלרגנים - PPD ליונקים והאלרגן KAM העשוי ממספר זנים של מיקובקטריה לא טיפוסית (2; 3; 4).
בדיקת אלרגיה סימולטנית משמשת לאבחון ראשוני של שחפת בבקר ובגורי גירה קטנים ובתרנגולות בחוות משגשגות ואם תגובות לטוברקולין נגרמות על ידי מיקובקטריות לא טיפוסיות וספרופיטים עמידים לחומצה (3).
הבעלים של פרות בעלות תנובה גבוהה חולקים על חוקיות השחיטה הבקרה והאבחונית של בעלי חיים שנתנו תגובה חיובית לבדיקת השחפת, ודורשים שיטות אבחון לכל החיים לבחינה מחדש של בעלי חיים פרודוקטיביים לשחפת. שימוש ב"שיטה המוצעת אבחון מוקדםשחפת בעלי חיים" מביא בהירות לנושא השנוי במחלוקת זה, שכן הוא מאפשר לקבוע באופן חד משמעי את הספציפיות או אי הספציפיות של התגובה של האורגניזם החי למתן תוך עורי של טוברקולין ולבסוף לבצע אבחנה.
יתרה מכך, בדיקה סימולטנית מותרת 30 ימים או יותר לאחר השחפת האחרונה של בעלי חיים, שאינה עומדת בדרישות של אבחון מוקדם (פרה-קליני) של שחפת בתקופת מחקר קצרה.
לפיכך, החסרונות של השיטות המוכרות לאבחון שחפת הם המורכבות, תקופות המחקר הארוכות וחוסר האפשרות לקבוע את סוג המיקובקטריה בימים הראשונים לאחר ההדבקה.
השיטה מבוססת על המופיע מיד רגישות יתרלויקוציטים ליצור מגע חוזר עם האנטיגן (אלרגן) מחוץ לגוף. מטרת ההמצאה היא לפתח שיטה חדשה. משימה זו מושגת באמצעות התגובה של תמוגה ספציפית של לויקוציטים (RSLL).
השיטה מתבצעת על ידי בחינת הדם של RSLL מבעלי חיים המגיבים בצורה חיובית לטוברקולין, שזוהה בחוות משגשגות ובחצרות על ידי מחקרים אלרגיים מתוכננים, תוך שימוש בטוברקולינים (PPD ליונקים, PPD לציפורים ו-CAM) כאבחון.
יתרה מכך, בעת אבחון שחפת בבקר, RSLL מתבצע עם PPD-טוברקולין ליונקים, PPD-טוברקולין לציפורים ו-KAM - אלרגן מורכב ממיקובקטריות לא טיפוסיות.
אבחון שחפת בחזירים מתבצע עם PPD-טוברקולין ליונקים ו-PPD-טוברקולין לציפורים.
PPD-טוברקולין ליונקים משמש לאבחון שחפת אצל כלבים וטורפים.
אבחון שחפת בארנבות ובבעלי חיים נושאי פרווה RSLL מתבצע עם PPD-טוברקולין ליונקים, PPD-טוברקולין לציפורים ו-CAM.
ארגון המחקר על שחפת RSLL
בניסויים על ארנבות, כלבים, חזירים ועגלים, נעשה שימוש בחיידקים חיים של זן החיסון BCG-1 לרגישות של האורגניזם החי במינוני חיסון: אחד (0.05 מ"ג), שניים (0.1 מ"ג), שלושה (0.15 מ"ג), חמישה (0.25 מ"ג) ועשרה (0.50 מ"ג).
המחקרים בוצעו בתנאי ניסוי על לויקוציטים בדם של חיות מחוסנות BCG שלמות ובתנאי ייצור - פרות שנתנו פעמיים תגובה חיובית לזריקה תוך-עורית של PPD-טוברקולין ליונקים, בחוות "שחר" ב-Matveevo-Kurgan. אזור.
המטרה העיקרית של המחקר היא להשתמש בתוצאות של RSLL לאבחנה מבדלת וקביעה של:
1) רגישות של לויקוציטים של האורגניזם החי על ידי mycobacteria של חיסון BCG;
2) זיהום של פרות שנתן תגובה חיובית כפולה של טוברקולין;
3) תגובות לא ספציפיות לטוברקולין במתן תוך עורי.
בניסוי נבחרו בעלי חיים שלמים בריאים מבחינה קלינית, ששימשו כבקרת רקע. קבוצות נוצרו על ידי בעלי חיים שבהם התקבלו ערכים יציבים של פרמטרים המטולוגיים (מספר לויקוציטים,% תמוגה וכו') במחקר פי 3 של דגימות דם.
לפחות שלוש חיות נלקחו לכל קבוצת ניסוי. מכל חיה נלקח דם, שחולק לדגימות בקרה וניסויים. בדגימת הביקורת נוספה לדם תמיסת נתרן כלוריד פיזיולוגית 0.9% ובדגימות הדם הניסיוניות - טוברקולינים - PPD ליונקים, PPD לציפורים ו-CAM.
כדי למנוע שגיאות בתשומת הלב של טכניקת ספירת האלמנטים שנוצרו וכדי להשיג ערכים ממוצעים אמינים של ערכי מדדי תגובת הדם, כל דגימה (ביקורת וניסויית) נבדקה בשלוש חזרות.
ההליך לביצוע מחקר על שחפת RSLL
חקר בעלי חיים לשחפת מתבצע תחילה בשיטת השחפת באופן ובתנאים שנקבעו ב"בקרה ואבחון אפיזוטיות של שחפת בבעלי חיים ממינים שונים" (2).
PPD-טוברקולין ליונקים, PPD-טוברקולין לציפורים ואלרגן מורכב ממיקובקטריה לא טיפוסית (CAM) נלקחים כאבחון.
בעדרים ללא שחפת, בקבוצות ובבעלי חיים בודדים, שיטת המחקר העיקרית היא בדיקת שחפת תוך עורית. אם מתגלים בעלי חיים המגיבים לטוברקולין, בעלי חיים מגיבים חיוביים מבודדים, לובשים רצועה ונלקח מהם דם למחקר בתגובה של תמוגה של לויקוציטים ספציפיים (RSLL) עם האבחון הבא:
בבקר נלקח דם נוגד קרישה ב-RSLL
א) מִלְחִיתנתרן כלורי (דגימת בקרה);
ד) PPD-טוברקולין לציפורים.
יחד עם זאת, חיות שנתנו תוצאות חיוביותמחקרים של RSLL עם PPD-טוברקולין ליונקים נחשבים לשחפת
בחזירים נלקח דם נוגד קרישה ב-RSLL
א) תמיסת מלח פיזיולוגית;
ב) PPD-טוברקולין ליונקים;
ג) PPD-טוברקולין לציפורים.
חזירים החיוביים ל-PPD-tuberculin RLSL של יונקים נחשבים לשחפת, בעוד אלו החיוביים ל-PPD-tuberculin RLL של עופות נחשבים נגועים במיקובקטריה של עופות;
בכלבים ובבעלי חיים קטנים אחרים, RSLL נלקח
א) מי מלח פיזיולוגי;
ב) PPD-טוברקולין ליונקים;
בארנבות נלקח דם נוגד קרישה ב-RSLL
א) תמיסת נתרן כלורי מלוחים;
ב) PPD-טוברקולין ליונקים;
ג) PPD-טוברקולין לציפורים;
יחד עם זאת, ארנבות שנתנו RLLS חיובי עם PPD-טוברקולין ליונקים נחשבים נגועים במיני הבקר של הגורם הגורם לשחפת, וב-PPD-טוברקולין לעופות - הנגועים במיני העופות של הפתוגן, ב-CAM - מיקובקטריות לא טיפוסיות רגישות ללא שחפת.
מטרת ההמצאה היא להפחית את זמן הגילוי של הגורם הסיבתי לשחפת בבעלי חיים ולקבוע את סוג המיקובקטריה שגרמה לרגישות.
השגת מטרה זו מבוססת על התופעה של רכישה מיידית לאחר החדרת הפתוגן על ידי תאים חיסוניים בעלי רגישות מוגברת של הגוף, המתגלה בחשיפה חוזרת מחוץ לגוף של אותו אנטיגן ללוקוציטים בדם. רגישות יתר לאחר זיהום היא תופעה תאית שבה תאי האפקטור המקיימים אינטראקציה עם טוברקולין מחוץ לגוף הם לויקוציטים בדם רגישים, השונה מ-Delayed-type hypersensitivity (HRHT) של הגוף, המתפתחת בבעלי חיים 2-3 שבועות לאחר ההדבקה עם הגורם הסיבתי של שחפת.
יישום השיטה
השיטה לאבחון מוקדם של שחפת בבעלי חיים מתבצעת כדלקמן. בבאר הטבליה המכילה 0.05 מ"ל מתמיסת 3.8% של נתרן ציטראט (הפרין, טרילון B או כל נוגד קרישה אחר) מוסיפים 0.1 מ"ל מדם הבדיקה ומינון עבודה של טוברקולין בנפח 0.05 מ"ל (מבחנות) . את צינורות הבקרה ממלאים באותו נפח עם מי מלח פיזיולוגי ללא טוברקולין. הדם בבארות הטבליה מודגרת למשך שעתיים ב-t=37°C, תוך ניעור כל 30 דקות. לאחר מכן, מבארות הביקורת והניסוי, 0.02 מ"ל של דם מועבר לבאר עם 0.4 מ"ל נוזל טורק (תמיסה של 3-5% של חומצה אצטית, בגוון בכמה טיפות של תמיסת מתילן כחול) כדי להשמיד אריתרוציטים ולהכתים את גרעינים של לויקוציטים. מספר הלויקוציטים נספר (בתא Goryaev) בכל הבארות ושיעורי התגובה של תמוגה ספציפית של לויקוציטים מחושבים (באחוזים) לפי הנוסחה
כאשר L ל ו-L בערך - המספר המוחלט של לויקוציטים בדגימות הבקרה והניסוי. RSLL נחשב חיובי בשיעור של 10% או יותר.
דוגמה 1. מנת עבודה של טוברקולינים
ערכת ניסויים לקביעת מינון העבודה של טוברקולינים (היחס בין נוגדי קרישה, דם וטוברקולין)
בסכימת הניסויים לקביעת מינון העבודה של טוברקולינים, הוכח כי יחסי הנפח של נוגד הקרישה והדם בדגימות נשארו זהים, ומינוני הטוברקולינים גדלו: 0.05; 0.1 ו-0.15 מ"ל
| שולחן 1 קביעת מינון העבודה של טוברקולינים (ממוצע קבוצתי) עבור בקר וחזירים ב-RSLL |
||||||||||||
| מינון של אנטיגן | בקר | חזירים | ||||||||||
| מספר הלויקוציטים במהלך האינטראקציה "במבחנה" (10 9// ליטר) | RSLL ב-% | מספר הלויקוציטים במהלך האינטראקציה "במבחנה" (10 9 / ליטר) | RSLL ב-% | |||||||||
| פתרון פיזי | PPD, ml. | קאם | ציפורים | PPD, ml. | קאם | ציפורים | פיזי. רר | PPD ml. | ציפורים | PPD ml. | ציפורים | |
| 0,05 | 9,5 | 9,6 | 9,4 | 9,5 | -1% | 1% | 0 | 9,3 | 9,2 | 9,4 | 1% | 1% |
| 0,1 | 9,5 | 9,5 | 9,4 | 9,4 | 0% | 1% | 1 | 8,6 | 8,7 | 8,7 | 1% | 1% |
| 0,15 | 9,3 | 9,0 | 9,1 | 9,2 | 3% | 2% | 1 | 8,7 | 8,4 | 8,8 | 3% | 2% |
כפי שניתן לראות מטבלאות 1 ו-2, RSLL בכל הדגימות אינו עולה על 3% בבקר, חזירים, 7.4% בכלבים ו-2% בארנבות, לכן חסכוני יותר להשתמש במינון של 0.05 מ"ל טוברקולין כתרופה. מנת עבודה, כי RSLL שלה היה נמוך יותר מאשר במינון של 0.15. והערך שלו היה כמעט זהה עבור הסל"ד של יונקים, RTP של ציפורים ו-CA.
לפיכך, מינון העבודה של טוברקולינים נקבע לפי הערך של 0.05 מ"ל עבור RSLL.
דוגמה 2. ספציפיות ופעילות של RSLL בדם של שוורים שחוסנו עם BCG-1
בניסויים על שוורים בני 4-6 חודשים, נחקרו הספציפיות והפעילות של RSLL. לשם כך הוזרקו לבעלי החיים מיקובקטריות חיות מזן החיסון BCG-1 במינוני חיסון: 0.05 מ"ג, 0.15 מ"ג, 0.25 מ"ג ו-0.50 מ"ג (מנה אחת, שלוש, חמש, עשר), ולאחר מכן נבדק הדם. ב-RSLL ביום החיסון וכל 24 שעות למשך 10 ימים (240 שעות).
מספר הלויקוציטים בדגימות דם עם PPD ליונקים נע בין 8.2 ל-9.1·10 9/ליטר. ראוי לציין כי בדגימות דם משוורים שחוסנו עם BCG, בעת אינטראקציה עם DAA ליונקים, נרשמה ירידה במספר הלויקוציטים 48-120 שעות לאחר מתן החיסון בהשוואה לדגימות אחרות, אך מספרם היה בטווח של טווח נורמלי.
באותן שעות לאחר החדרת מיקובקטריות חיות לדגימות דם עם תמיסה פיסיולוגית PPD לציפורים ו-CAM, מספר הלויקוציטים היה כמעט זהה ונע בין 9.2 ל-11.3·10 9 /ליטר, כלומר. מצא לויקוציטוזיס, שהיה חזק יותר, כך היה מינון החיסון גדול יותר של חיסון מיקובקטריה. BCG-1.
כפי שניתן לראות מטבלה 3, בדגימות דם עם PPD ליונקים, RSLL חיובי זוהה כבר 24 שעות לאחר רגישות של בקר עם חיסון BCG, בדגימות דם עם PPD לציפורים ו-CAM, האינדיקטורים ל-RSLL היו שליליים.
| שולחן 3 מדדי RSLL בבקר שעבר רגישות עם חיסון BCG עם טוברקולינים: DAA ליונקים, DAA לציפורים ו-CAM |
||||||||||||
| זמן לאחר החיסון, ח | ||||||||||||
| אחד (0.05 מ"ג) | שלושה (0.15 מ"ג) | חמישה (0.25 מ"ג) | עשר (0.50 מ"ג) | |||||||||
| PPD ml. | PPD ו' | קאם | PPD ml. | PPD ו' | קאם | PPD ml. | PPD ו' | קאם | PPD ml. | PPD ו' | קאם | |
| ביום הרגישות | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 1,2 | 0 | 1 | 0 | 0 | 1 |
| 24 | 14 | 0 | 1 | 14,3 | 0 | 0 | 16,2 | 1 | 1 | 34,3 | 1 | 1 |
| 48 | 27 | 0 | 0 | 32,5 | 0 | 0 | 28,6 | 1 | 0 | 48,3 | 0 | 0 |
| 72 | 23 | 0 | 1 | 25,5 | 0 | 1 | 21,6 | -1 | 1 | 41,3 | -1 | 1 |
| 96 | 17 | 0 | 0 | 10,8 | 0 | 0 | 19,5 | 0 | 0 | 35 | 0 | 1 |
| 120 | 13 | 0 | 0 | 5 | 1 | 0 | 10,3 | 0 | 0 | 24,2 | 0 | 1 |
| 144 | 7 | 1 | 1 | 1 | 0 | 0 | 6,3 | 0 | 1 | 20 | 1 | 1 |
| 168 | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 2,4 | 0 | 1 | 15,1 | 0 | 1 |
| 192 | 1 | 0 | 0 | 1,2 | 0 | 1 | 8,6 | 0 | 1 | |||
| 216 | 0 | 0 | 0 | 6 | -1 | 1 | ||||||
| 240 | 0 | 0 | 0 | |||||||||
| - PPD ו'. - PPD לציפורים |
התוצאות שהתקבלו של המחקרים מצביעות על הספציפיות של RLLS. ניתן להשתמש ב-RSLL כדי לזהות בעלי חיים שעברו רגישות על ידי מיקובקטריה עם אנטיגנים הקשורים לטוברקולין.
הפעילות של RSLL מאופיינת בעובדה שעם עלייה במינון של מיקובקטריות חיות של החיסון pcs. BCG-1 מ-0.05 מ"ג ל-0.50 מ"ג לחיה מעלה את אינדקס RSLL.
לפיכך, נמצא שכאשר חוסנו במנת חיסון בודדת של BCG-1, השיעור הגבוה ביותר של RLLS עם PPD ליונקים היה 48-72 שעות לאחר ההזרקה (27-23%)
בעת רגישות לבקר עם שלוש מנות חיסון, נצפים גם ערכי RSLL חיוביים בו זמנית. אחוז מקסימליתמוגה מגיעה ל-32.5% לאחר כניסת חיסון BCG.
עם הכנסתן של חמש מנות חיסון לבעלי חיים, התמוגגת של לויקוציטים הייתה ארוכה יותר ונטתה לעלות במדד. מגמה זו נצפתה בבירור במיוחד כאשר ניתנו 10 מנות חיסון של חיסון BCG לבעלי חיים, כאשר תמוגה של לויקוציטים 48 שעות לאחר הזרקת החיסון הגיעה ל-48.3% והייתה ארוכה יותר, כלומר. עם עלייה במספר מנות החיסון, אחוז הלויקוציטים שעברו רגישות עלה והדבר השפיע על האינדיקטורים של RSLL (טבלה 3).
תוצאות מדדי ה-RSLL, בהתאם למספר מנות החיסון של חיסון BCG-1, מצביעות על פעילות בולטת של ה-RSLL.
לפיכך, השיעור היומי הממוצע של RSLL עם PPD עבור יונקים במשך 120 שעות עם מנת חיסון אחת של mycobacterium BCG היה 18.8%, שלושה - 20.8%, חמישה - 19.24% ועשר - 32.2%. עם עשר מנות חיסון של BCG, השיעורים החיוביים של RLLS עם DAA ליונקים מתארכים לשבעה ימים.
ביצעו מחקרים עם זריקות של חיסון חיסון מיקובקטריה. BCG איפשר לקבוע את הספציפיות והפעילות של RSLL, הנחוצה לאבחנה מבדלת של תגובות ספציפיות ולא ספציפיות לטוברקולין.
דוגמה 3. מחקר לקביעת רגישות בחזירים הנגרמת על ידי החדרת מיקובקטריות חיות של חתיכת החיסון. BCG-1
בוצעו ניסויים על חזרזירים נגמלים משלוש קבוצות, אשר הוזרקו להם מנה אחת, שלוש וחמש מנות חיסון של חיסון BCG. מספר הלויקוציטים בחזירים רגישים עם מנה בודדת של חיסון BCG עם PPD של יונקים נע בין 7.2 ל-8.8 10 9/ליטר, ועם PPD מלוחים לציפורים, התנודות נעו בין 8.7 ל-14.3 10 9/ליטר. המספר הגדול ביותרספירת הלויקוציטים הייתה 48 שעות לאחר החיסון. אותו דפוס צוין עם הצגת שלוש וחמש מנות חיסון של חיסון BCG, כאשר מספר הלויקוציטים עם מי מלח ו-PPD עבור ציפורים לאחר 48 שעות הגיע ל-15.4 ו-18.6·10 9 /ליטר, בהתאמה. כתוצאה מכך, שיעור RSLL עם DAA עבור יונקים בחזירים שעברו רגישות לאחר 24 שעות עם מנת חיסון אחת היה 26.9%, שלושה - 28.9%, 5 - 38.1%. השיעור הגבוה ביותר של RSLL היה 48-72 שעות לאחר הרגישות והסתכם ב-46.6-49.7%; 41.5-46.7%; 49.7-55.4% לפי מינונים (טבלה 4).
| טבלה 4 מדדי RSLL בחזירים שעברו רגישות עם חיסון BCG עם טוברקולינים: DAA ליונקים, DAA לציפורים |
||||||
| זמן לאחר החיסון, ח | מספר מנות החיסון של חיסון BCG | |||||
| אחד (0.05 מ"ג) | שלושה (0.15 מ"ג) | חמישה (0.25 מ"ג) | ||||
| PPD ml. | ציפורים | PPD ml. | ציפורים | PPD ml. | ציפורים | |
| ביום הרגישות | -1 | 0 | 0,9≈1 | 0 | 0 | 1 |
| 24 | 26,9 | 1 | 28,9 | 1 | 38,1 | 0 |
| 48 | 49,65 | 1 | 46,7 | 1 | 55,4 | 0 |
| 72 | 46,61 | 0 | 41,5 | 1 | 49,7 | 1 |
| 96 | 34,45 | 0 | 26,9 | 1 | 19 | 0 |
| 120 | 17,82 | 0 | 20,9 | 1 | 13 | 0 |
| 144 | 1,15 | -1 | 7,8 | 0 | 6,4 | 1 |
| 168 | 0 | 0 | 1,8 | 1 | 1,8 | -1 |
| 192 | 0 | 1 | ||||
| - PPD ml. - PPD ליונקים | ||||||
| - PPD ו'. - PPD לציפורים |
בחזרזירים מחוסנים נמצאו אינדיקטורים חיוביים ל-RSLL 24-120 שעות לאחר מתן מנה אחת, שלוש וחמש מנות חיסון של חיסון BCG.
RSLL עם DPD עבור ציפורים היה שלילי, מה שמאשר את הספציפיות של RSL עם DPD עבור יונקים.
דוגמה 4. מחקר לקביעת רגישות בכלבים הנגרמת כתוצאה מהחדרת חלקי חיסון חיים של מיקובקטריה. BCG-1
בניסויים על כלבים לאחר הכנסת חיסון אחת, שלוש, חמש מנות חיסון של חיסון BCG, נמצא כי לאחר 24-72 שעות, כאשר דם קיים אינטראקציה עם מי מלח, מספר הלויקוציטים היה 5.2-6.2 10 9/ליטר, ועם PPD ליונקים 3 .4-4.7 10 9 /l, כלומר. לוקופניה צוינה.
מספר הלויקוציטים עם מי מלח פיזיולוגי גדל בהשוואה לנורמה פי שניים או יותר. כתוצאה מכך, האינדיקטורים של RSLL הסתכמו ב-14-25% עם מנה אחת, 20.8-60.6% עם שלוש, ו-22-68% עם חמש. השיעור הגבוה ביותר של RSLL היה 48 שעות לאחר החיסון. ערכי RSLL חיוביים צוינו במנה אחת לאחר 24-96 שעות, בשלושה לאחר 24-120 שעות, בחמישה לאחר 24-240 שעות, כלומר. עם עלייה במינון החיסון, משך הרגישות של לויקוציטים גדל והפעילות עלתה - אינדיקטורים של RSLL (טבלה 5).
| טבלה 5 מדדי RSLL בכלבים וארנבות שעברו רגישות עם חיסון BCG |
|||||||||
| זמן לאחר החיסון (שעה) | מספר מנות החיסון של חיסון BCG | ||||||||
| כלבים | ארנבים | ||||||||
| אחד (0.05 מ"ג) | שלוש (0.15 מ"ג) | חמש (0.25 מ"ג) | חמש (0.25 מ"ג) | עשר (0.50 מ"ג) | |||||
| PPD ml. | PPD ml. | PPD ml. | PPD ml. | ציפורים | קאם | PPD ml. | ציפורים | קאם | |
| ביום הרגישות | 1 | 0 | 0,7 | 1 | 0 | 1 | 0 | 0 | 1 |
| 24 | 24 | 45,9 | 60,5 | 58 | 1 | 0 | 56 | 1 | 0 |
| 48 | 25 | 60,6 | 68 | 71 | 0 | 0 | 72 | 0 | 0 |
| 72 | 23 | 50 | 63,8 | 71 | 0 | 1 | 41 | 1 | 0 |
| 96 | 14 | 43,6 | 62,6 | 36 | 1 | 0 | 26 | 1 | 0 |
| 120 | 1,9 | 20,8 | 57,4 | 2 | 0 | 1 | 30 | 0 | 1 |
| 144 | 1 | 3,4 | 54,9 | 0 | 1 | 0 | 25 | 0 | 0 |
| 168 | 1 | 1 | 41,2 | 0 | 0 | 0 | 19 | 0 | 1 |
| 192 | 0 | 0 | 0 | 0 | 17 | 1 | 1 | ||
| 216 | 32 | 0 | 0 | 1 | 17 | 0 | 0 | ||
| 240 | 22 | 0 | 1 | 0 | 13,7 | 0 | 0 | ||
| 264 | 0 | 0 | 1 | 1 | 16,0 | 1 | 0 | ||
| 288 | 1,4 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | ||
| 336 | 1 | 0 | 1 | 0 | 0 | 0 | |||
| 408 | 23 | 1 | 1 | ||||||
| 672 | 1 | 0 | 0 | ||||||
| - PPD ml. - PPD ליונקים | |||||||||
| - PPD ו'. - PPD לציפורים |
דוגמה 5. מחקר לקביעת רגישות בארנבות הנגרמת על ידי החדרת מיקובקטריות חיות של חתיכת החיסון. BCG-1
כאשר חיסנו ארנבות בחמש מנות חיסון של חיסון BCG, התכולה הנמוכה ביותר של לויקוציטים בדם בעת אינטראקציה עם PPD עבור יונקים נמצאה לאחר 24 ו-72 שעות (4.6-4.7 10 9 /ליטר), ובעשר מנות, המספר הקטן ביותר של לויקוציטים בעת אינטראקציה עם PPD עבור יונקים היה לאחר 24 שעות (3.8 10 9 /ליטר) ו-48 שעות (4.7 10 9 /ליטר). המוזרות היא שבמהלך האינטראקציה של דם עם PPD ליונקים לאחר 72-264 שעות ו-408 שעות לאחר החיסון, מספר הלויקוציטים היה גבוה פי כמה מהנורמה, והסתכם ב-11-28.5 10 9 /ליטר, כלומר. לוקוציטוזיס צוין במקום לויקופניה. ובמקביל, מספר הלויקוציטים בדגימות עם מי מלח פיזיולוגי (דגימות בקרה) עלה משמעותית על מספרם בדגימות ניסוי והסתכם ב-25.0-38.7 10 9 /ליטר. נקבע כי על רקע ליקוציטוזיס הנגרמת כתוצאה מהחדרת מינונים גדולים של חיסון BCG, RSLL בארנבות היה חיובי ונע בין 13.7 ל-72% (טבלה 5).
דוגמה 6. בדיקת דגימות דם של פרות RSLL שנתנו תגובה חיובית כפולה לטוברקולין
אבחון תגובות שחפת של תמוגה ספציפית של לויקוציטים RSLL בתנאי ייצור בוצע ב-SEC "Dawn" של אזור Matveevo-Kurgan.
באוקטובר 2006, שבע מתוך 198 הפרות שנבדקו הגיבו בצורה חיובית לטוברקולין בחווה שהצליחה בעבר. עם שחפת חוזרת ונשנית לאחר 45 יום, הם שוב נתנו תגובה חיובית. מתן תוך עורי של טוברקולין הביא להיווצרות של נפיחויות מפוזרות בעקביות עדנית, קפל העור התעבה ב-5-10 מ"מ.
לפני השחיטה, פרות דיממו לצורך בדיקה בתגובה של תמוגה של לויקוציטים ספציפיים (RSLL). תוצאות מחקרים על מספר הלויקוציטים ואינדיקטורים של RSLL בפרות עם תגובה בולטת לטוברקולין מוצגות בטבלה 6.
| טבלה 6 RSLL ונתונים פתואנטומיים בפרות שהגיבו בחיוב לטוברקולין |
|||||||
| מספרי מלאי של פרות | מספר הלויקוציטים ואינדקס הדם RSLL בעת אינטראקציה עם | ||||||
| פִיסִיוֹלוֹגִי פִּתָרוֹן | PPD עבור ml. | PPD עבור ציפורים | קאם | ||||
| מספר אגמים | מספר אגמים | RSLL% | מספר אגמים | RSLL% | מספר אגמים | RSLL% | |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
| 6827 | 7,7 | 5,5 | 29 | 7,6 | 1 | 7,55 | 2 |
| 071 | 11,0 | 7,1 | 36 | 11,0 | 0 | 10,5 | 1 |
| 4006 | 5,05 | 5,0 | 1 | 5,0 | 1 | 5,05 | 1 |
| 4018 | 9,5 | 2,75 | 71 | 9,35 | 2 | 9,4 | 1 |
| 162 | 5,0 | 4,8 | 4 | 4,9 | 1 | 4,9 | 1 |
| 109 | 5,0 | 4,9 | 2 | 5,0 | 0 | 4,9 | 1 |
| 148 | 5,75 | 4,2 | 27 | 5,7 | 1 | 5,7 | 1 |
כפי שניתן לראות מטבלה 6, מתוך שבע הפרות שהגיבו למתן תוך עורי של טוברקולין, רק ארבע מה-RSLL היו חיוביות (מלאי מס' 6827; מס' 071; מס' 4018; מס' 148) כאשר דגימות דם קיימו אינטראקציה עם PPD-טוברקולין ליונקים. דגימות דם עם PPD-טוברקולין לציפורים ו-CAM נתנו אינדיקטורים שליליים של RSLL.
בדיקה וטרינרית של שחיטת הבקרה והאבחון של פרות שהגיבו בצורה חיובית לטוברקולין הראתה שמתוך ארבע בעלי חיים עם אינדיקטורים חיוביים ל-RLLS, רק בשניים היו שינויים בבלוטות הלימפה האופייניות לשחפת: בפגר אחד בתת-הלוע ובלוע, וב- בלוטות הלימפה המדיסטינליות והמזנטריות השניות. בפגרים של שתי פרות עם תגובה חיובית לבדיקת טוברקולין ואינדיקטורים חיוביים ל-RSLL, שינויים פתואנטומיים האופייניים לשחפת לא זוהו חזותית באיברים הפנימיים ובלוטות הלימפה. זה כנראה בגלל ההדבקה האחרונה של בעלי חיים בגורם הסיבתי של שחפת, ועדיין לא נוצרו שינויים פתולוגיים. בנוסף, במהלך הביקורת והאבחון שלאחר המוות, נמצא כי שתי פרות בעגל עמוק (7-8.5 חודשי הריון) ואחת עם אנדומטריטיס חריפה עם זיהום סטרפטוקוקלי נתנו תגובות חיוביות למתן תוך עורי של טוברקולין. שינויים פתולוגיים בפרות שהגיבו בחיוב לטוברקולין מוצגים בטבלה 7.
| טבלה 7 שינויים פתולוגיים ואנטומיים בפרות שהגיבו בחיוב לטוברקולין |
|
| מספר פרות | שינויים פתולוגיים |
| 6827 | לא נמצאו שינויים פתולוגיים באיברים הפנימיים ובבלוטות הלימפה. |
| 071 | בלוטת הלימפה העל-עורקית מונחת יתר על המידה, לבלוטת הלימפה הכבדית יש מוקדי חלב על החתך, לא נמצאו שינויים פתולוגיים אחרים באיברים הפנימיים ובבלוטות הלימפה. |
| 4006 | אנדומטריטיס לאחר לידה, שינויים פתולוגיים אחרים באיברים הפנימיים ובלוטות הלימפה לא זוהו |
| 4018 | לבלוטת הלימפה השמאלית התת-למיתית שעל החתך היו מוקדים נמקיים אפורים-לבנים, לא נמצאו שינויים פתולוגיים אחרים באיברים הפנימיים ובבלוטות הלימפה |
| 162 | שינויים אנטומיים פתולוגיים באיברים הפנימיים ובלוטות הלימפה לא זוהו, הריון 7 חודשים |
| 109 | שינויים אנטומיים פתולוגיים באיברים הפנימיים ובלוטות הלימפה לא זוהו, הריון 7.5 חודשים |
| 148 | לא נמצאו שינויים פתולוגיים באיברים הפנימיים ובלוטות הלימפה, הריון 8 חודשים |
בדיקת הבקרה והאבחון של פרות שנשחטו שהגיבו בחיוב לטוברקולין הראו שבארבעה מקרים מתוך שבעה, בדיקת טוברקולין חיובית חופפת ל-RSLL חיובי (B=4:7=0.57); במקרה אחד (B=1:7=0.14) של שלוש פרות עם הריון של 7-8 חודשים. בדיקת טוברקולין חיובית עלתה בקנה אחד עם עומק (8 חודשים; B=1:3=0.33); במקרה אחד - עם זיהום סטרפטוקוקלי (אנדומטריטיס חריפה; B=1:7=0.14).
RSLL בשני מקרים מתוך ארבעה אינדיקטורים חיוביים עלו בקנה אחד עם זיהוי שינויים פתואנטומיים האופייניים לשחפת (B=2:4=0.5), ובשני מקרים מתוך ארבעה (B=2:4=0.5) נתונים פתואנטומיים חזותיים לא מצאו את זה. נמצא כי זה לא יכול להיות הבסיס להחרגת זיהום מוקדם עם mycobacteria, כאשר שינויים פתולוגיים עדיין לא נוצרו.
סִפְרוּת
1. אבחון שחפת. // V.P.Urban, M.A.Safin, A.A.Sidorchuk, M.V.Kharitonov, R.S.Sigbatulin, F.G. אקברוב. // סדנה בנושא אפיזוטולוגיה ו מחלות מדבקותעם טיפול וטרינרי. ספר לימוד. מוסקבה: קולוס, 2003, עמ' 82-86.
2. בקרה אפיזוטולוגית ואבחון שחפת בבעלי חיים ממינים שונים. מניעה ובקרה של מחלות זיהומיות הנפוצות לבני אדם ובעלי חיים. אוסף חוקים סניטריים וטרינרים. אד. רשמי. Goskomsanepidnadzor מרוסיה. משרד החקלאות של רוסיה. מוסקבה. 1996, עמ' 164-167.
3. הנחיות לעריכת בדיקה בו זמנית באמצעות טוברקולין ואלרגן מורכב ממיקובקטריה לא טיפוסית (AM) באבחון שחפת בבעלי חיים. חקיקה וטרינרית. כרך 3. מוסקבה: קולוס, 1981, עמ' 220-224.
4. שרוב א.נ. שַׁחֶפֶת תרופות וטרינריות» מדריך (בעריכת דוקטור למדעי הביולוגיה D.F. Osidze). מוסקבה: קולוס, 1981, עמ' 192-201.
1. שיטה לאבחון מוקדם של שחפת בבעלי חיים, לרבות זיהוי בעלי חיים מגיבים לשחפת בחוות ובחצרות משגשגות על ידי בדיקות אלרגיות מתוכננות, המאופיינת בכך שמבעלי חיים המגיבים חיובית לשחפת, נבדק הדם על ידי תגובת תמוגה הספציפית של לויקוציטים (RSLL) באמצעות PPD tuberculins כאבחנה ליונקים, PPD לציפורים ו-KAM.
2. השיטה לאבחון מוקדם של שחפת לפי תביעה 1, המאופיינת בכך שבאבחון שחפת בבקר מתבצע RSLL עם PPD-טוברקולין ליונקים, PPD-טוברקולין לעופות ואלרגן קומפלקס KAM ממיקובקטריות לא טיפוסיות.
3. שיטה לאבחון מוקדם של שחפת לפי תביעה 1, המאופיינת בכך שבעת אבחון שחפת בחזירים מבצעים RSLL עם PPD-טוברקולין ליונקים ו-PPD-טוברקולין לציפורים.
// 2341288 // 2443428
ההמצאה מתייחסת לתחום המיקרוביולוגיה הווטרינרית
ההמצאה מתייחסת לתחום הביוטכנולוגיה