שיטות מחקר סרולוגיותזיהוי של AT ו-Ag ספציפיים של הפתוגן הוא כלי חשוב באבחון מחלות זיהומיות. הם בעלי ערך מיוחד במקרים בהם לא ניתן לבודד את הפתוגן. במקרה זה, יש צורך לזהות עלייה בטיטרי AT, ולכן נבדקות דגימות נסיוב זוגיות שנלקחו במרווח של 10-20 ימים (לעיתים מרווח זה יכול להיות ארוך יותר). AT מופיעים בדם בדרך כלל בשבוע ה-1-2 למחלה ומסתובבים בגוף במשך זמן רב יחסית, מה שמאפשר להשתמש בזיהוי שלהם למחקרים אפידמיולוגיים רטרוספקטיביים. ההגדרה של מחלקות Ig מאפיינת בבירור את שלבי התהליך הזיהומי, ויכולה לשמש גם קריטריון פרוגנוסטי עקיף.לשיטות לגילוי אנטיגנים מיקרוביאליים יש חשיבות מיוחדת. הם מופיעים בכמויות משמעותיות כבר לכל היותר דייטים מוקדמים, מה שהופך את זיהוים לכלי חשוב לאבחון מהיר של מחלות זיהומיות, וקביעתם הכמותית בדינמיקה של התהליך הזיהומי משמשת קריטריון ליעילות הטיפול האנטי-מיקרוביאלי.
שיטות מחקר אלרגולוגיות
אנטיגנים של פתוגנים רביםיש אפקט רגיש, המשמש לאבחון מחלות זיהומיות, כמו גם במחקרים אפידמיולוגיים. נמצא הנפוצה ביותר בדיקות אלרגיה לעור, כולל מתן תוך עורי של Ag (אלרגן) עם התפתחות תגובת DTH. בדיקות עור מצאו יישום באבחון של מחלות כמו בלוטות, מלואידוזיס, ברוצלוזיס. המפורסמת ביותר היא בדיקת Mantoux, המשמשת הן לאבחון שחפת והן להערכת חסינות הגוף לפתוגן.
שיטות מחקר אלרגולוגיות
שיעור המחלות האלרגיות בפתולוגיה האנושית גדל בהתמדה. תפקיד חשובבאבחון שלהם נלקחת אנמנזה מחקר קליניחוֹלֶה. יחד עם זה, נעשה יותר ויותר שימוש בהגדרות של בדיקות אלרגיות עם אלרגנים חיידקיים ולא חיידקיים. בחירת שיטת בדיקת העור תלויה בסוג רגישות יתר, סוג האלרגן, מידת הרגישות, גיל.
בין אלרגנים אקסוגניים שאינם זיהומיים משמעות מיוחדתבתרגול של רופא השיניים יש תרופות. לעתים קרובות מציינת רגישות יתר לאנטיביוטיקה. חשיפה לאלרגנים אלו גורמת בדרך כלל לסוג מיידי של תגובה. לאבחון אלרגיה לתרופותחלק מהמרפאות משתמשות בבדיקות עור. בדיקות עור עם תרופות (במיוחד עם אנטיביוטיקה) צריכות להתבצע בזהירות, שכן חולים עם רגישות יתר עלולים לפתח תגובה חמורה - הלם אנפילקטי. יש צורך להתחיל בבדיקת נפילה לא רגישה. לאחר קבלת בדיקת נפילה שלילית, לאחר מכן מבצעים צלקת, מריחה ותוך-עורית. אם בדיקת דקירת העור נותנת תוצאה חיובית, מחקר נוסף מופסק.
שיטת בדיקות עור טיפה. העור של משטח הכופף של האמה מנוגב באלכוהול או בתערובת של אלכוהול ואתר. טיפות של תרופת הבדיקה ותמיסת הבקרה מורחים במרחק של 5 ס"מ. במקרה של רגישות יתר, לאחר מספר דקות מופיעים גרד, נפיחות והיפרמיה במקום נטילת התרופה.
שיטת בדיקת צלקת עור. טיפות של תרופה ונוזל בקרה (ממס, תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית) מורחים על עור האמה שטופל באלכוהול. בעזרת אזמל אבעבועות שחורות מבצעים חתכים ליניאריים (5 מ"מ כל אחד) במקום מריחת הטיפות (למניעת הופעת דם). לעמוד מספר דקות ולהסיר את שאריות התמיסה בעזרת צמר גפן, ולאחר מכן נלקחות בחשבון תגובות עור מיידיות (לאחר 15-20 דקות) ומעוכבות (לאחר 24 שעות). הופעת פפולות (עד 3 מ"מ או יותר), כמו גם היפרמיה, פריחות שלפוחיות, תגובות אזוריות בלוטות לימפהנחשב כתגובה חיובית. באזור הבקרה של האמה, רק רצועה נראית.
שיטת מריחה בדיקות עור. גזה מקופלת בארבע שכבות (2X2 ס"מ) ספוג בתמיסה של החומר הנבדק בריכוז שאינו גורם בדרך כלל לגירוי בעור. גזה זו מוחלת על עור יבש מוחסר (בדרך כלל האמות), ולצידה, באותם תנאים בדיוק, גזה ספוגה בממס. כל חלק מכוסה בצלופן מלמעלה ומקובע בגבס. תוצאות הדגימות נלקחות בחשבון לאחר 24-48 שעות תגובה חיובית מאופיינת בהופעת דרמטיטיס. החיסרון של בדיקה כזו הוא היעדר אפשרי של תגובה עורית עם רגישות מוגברת של רירית הפה.
שיטת בדיקה תוך עורית. בדיקות תוך עוריות ב רפואת שינייםמשמשים בעיקר לאיתור רגישות לאלרגנים חיידקיים. האלרגנים הנפוצים ביותר הם סטרפטוקוק המוליטי, סטפילוקוק המוליטי, coli, פרוטאוס וולגרי, אשר מתקבלים בצורה מוגמרת. המשטח הפנימי של האמה מטופל באלכוהול ובאתר. עם מחט דקה קצרה, מוזרק תוך עור 0.1 מ"ל מהאלרגן המכיל 4 מנות עור. תגובות אלרגיות לעור נלקחות בחשבון לאחר 24-48 שעות.עם תגובה חיובית לאחר 24 שעות מתרחשות היפרמיה וחדירה במקום הזרקת האלרגן. גודל התגובה נחשב כדלקמן: תגובה חיובית חדה (+ + + +) - היפרמיה, הסתננות בקוטר של לפחות 30 מ"מ, כאב במישוש; תגובה חיובית (+ + +) - גודל המוקד הוא 21-29 מ"מ וכאב פחות בולט; תגובה חיובית חלשה (++) - מיקוד בגודל 15-20 מ"מ עם בצקת קלה; תגובה מפוקפקת (+) - פוקוס בגודל 10-15 מ"מ. עם תגובה חיובית או חיובית חדה לאלרגן אחד, החולה מוכר כמונו-אלרגי לאלרגן זה, עבור שניים או יותר - פולי-אלרגיה. מתן תוך עורי חוזר של אלרגנים חיידקיים אינו מומלץ יותר מפעם בחודש.
שיטות לאבחון מצבים אלרגיים המבוצעים מחוץ לגוף (במבחנה) בטוחות. הנפוצות ביותר הן התגובות של לויקוציטוליזה ולוקרגיה, בדיקה בזופילית, אינדיקטור לנזק לנויטרופילים.
תגובת הלויקוציטוליזה מבוססת על זיהוי ההשפעה המעוותת של אלרגנים חיידקיים על לויקוציטים. דם היקפי. אלרגן ספציפימעוות והורס 14% או יותר מהנויטרופילים, דפורמציה לא ספציפית (בקרה) אינה עולה על 10%. עוצמת תגובות העור ואחוז דפורמציה של נויטרופילים בתגובת לויקוציטוליזה קשורים ישירות (60-80). דפורמציה של יותר מ-35% מהנויטרופילים תואמת תגובה חיובית חדה בבדיקת עור, 25-34% - תגובה חיובית.
שיטת מחקר אלרגולוגית (ALMI)משמש לאיתור נוגדנים או לימפוציטים T שעברו רגישות לאלרגן בגוף.
משימות של ALMI:
אבחון של מחלות זיהומיות כרוניות, שבפתוגנזה שלהן מתרחשת רגישות לאנטיגנים מיקרוביאליים (HRT);
אבחון של מחלות אלרגיות (GNT);
פיתוח של טיפול ספציפי לחוסר רגישות לתגובות GNT מסוג מתווך.
שלבי ALMI:
אני מביים אלמי. איסוף אנמנזה אלרגית לצורך:
ביסוס נטייה תורשתית לאלרגיות;
לזהות גורמים המחמירים את האישיות היסטוריה אלרגית:
- הועבר מחלות מדבקות וזיהומיות חריפות;
- נוכחות או היסטוריה של כרוני מחלות דלקתיות(דלקת שקדים כרונית, סינוסיטיס, נזלת, דלקת כיס המרה, קוליטיס, כיבי עור כרוניים, אקזמה מיקרוביאלית, פורונקולוזיס, מחלות פטרייתיות בעור);
- זיהוי אלרגיות למזון, אלרגיה לאינהלציה, אלרגיה לחרקים, דרמטיטיס מגע;
- קבלת מידע על חיסונים מונעיםוהתגובות אליהם
- השגת מידע על הכנסת סמים הטרוגים ותגובות אליהם;
- קבלת מידע על תגובות להחדרת אנטיביוטיקה, תדירות השימוש באנטיביוטיקה, מידע על אי סבילות לתרופות אחרות.
ביסוס השפעת סילוק האלרגן: הקשר בין מגע עם אלרגן לשינוי במצבו של המטופל.
כן, אלרגי לקרדית. אבק ביתניתן לחשוד בפיתוח של החמרות הקשורות לניקוי המקום, עבודה עם ספרים. עם שינוי מקום מגורים, חומרת התסמינים יורדת לרוב, לעיתים עד להפוגה קלינית מלאה, עקב היעדר מגע עם טריגר אלרגני.
עם אלרגיות לאלרגנים תעשייתיים, המצב מחמיר לאחר סוף השבוע ("אפקט יום שני").
עם אלרגיות לתרופות, יש הפחתה או היעלמות של תסמיני האלרגיה לאחר הפסקת התרופה.
הנחות קבוצת אלרגנים:
- תקשורת עם הצטננותבחולים עם אסתמה סימפונות זיהומית-אלרגית, נזלת אלרגית;
- נוכחות של עונתיות;
אז, עם קדחת השחת, הקשר בין החמרה של המחלה לתקופת הפריחה של צמחים הוא בדרך כלל כל כך ברור, עד שבדיקה אלרגולוגית מתבקשת רק כדי להבהיר את ספקטרום האלרגנים לחוסר רגישות ספציפי.
אטופיק דרמטיטיס, עקב רגישות יתר לארגנים לאבק הבית ועובש, מחמירה בתחילת האביב לפני הפריחה ובסוף הסתיו (יותר זמן שהייה בבית).
- נוכחות של נטייה תורשתית בסוג המתווך של GNT;
5) בידול של אלרגיה למזון עם פראלרגיה (שימוש מספר גדולמוצרים המכילים אמינים פעילים ביולוגית, המחקה שלב פתופיזיולוגיסוג מתווך GNT) ואידיוסינקרטיה (אי סבילות למוצרים מסוימים, למשל מוצרי חלב, עקב פרמנטופתיה).
באבחון של אלרגיה למזון, מידע המצביע בבירור על הקשר של החמרה עם צריכת מוצר מזון מסוים הוא חיוני. זה לוקח בחשבון רק את ההחמרה, המתפתחת בטווח הזמן שבין מספר דקות ל-4 שעות מרגע אכילת המוצר החשוד.
חיוני לאיתור אלרגנים למזון הוא ביסוס אי סבילות למוצרים הדומים במבנה האנטיגני לאלרגן החשוד. למשל, חולים שאלרגיים ביצה, לרוב הם לא סובלים בשר עוף. במקרה של חוסר סובלנות חלב פרהלעתים קרובות יש לציין אלרגיה לבשר בקר.
IIשלב ALMI. הצהרה על בדיקות עור אלרגיות כרוך בהחדרת האלרגן לכאורה לגופו של המטופל.
אבל.לאנטיגנים של פתוגנים רבים יש אפקט רגיש, המשמש לאבחון מחלות זיהומיות, כמו גם במחקרים אפידמיולוגיים.
תגובות אלרגיות בעור מחלות מדבקותמופיעים מוקדם יחסית (מ-4-5 ימי מחלה), מגיעים לעוצמה הגבוהה ביותר ב-2-3 שבועות של מחלה. בהתאם לחומרת או עוצמת התהליך האלרגי, תגובה חיובית עשויה להימשך שנים (למשל, עם ברוצלוזיס) או להיעלם די מהר, תוך מספר שבועות או חודשים (למשל, עם דיזנטריה). בדיקות עור מצאו יישום באבחון של מחלות כמו בלוטות, מלואידוזיס, ברוצלוזיס. הידועה ביותר היא בדיקת Mantoux, המשמשת הן לאבחון שחפת והן להערכת חסינות הגוף לפתוגן (איור 50, 51).
בדיקות עור אלרגיות לאבחון HRT כוללות מתן תוך עורי של Ag (אלרגן). תכשירים אלרגניים מוכנים על ידי מוסדות מיוחדים - מכוני חיסונים וסרה. האלרגן החשוד מוזרק לעור בנפח של 0.1 מ"ל. התוצאה נלקחת בחשבון 24-72 שעות לאחר החדרת האלרגן לפי קוטר הפפולה (הסתננת).
אורז. חמישים.הגדרת מבחן Mantoux
אורז. 51.חשבונאות למבחן מנטו
ב. בדיקות עורמשמש באבחון של GNT מסוג מתווך. בדיקות העור, שהוצגו בשנת 1911, נותרו אחת מבדיקות האבחון האמינות ביותר. in vivo.בדיקות העור היו והן המדד לקביעת מהימנות כל הבדיקות. בַּמַבחֵנָה.בדיקת עור היא שיטה חשובה לאבחון רגישות ונמצאת בשימוש נרחב ברחבי העולם.
עבור בדיקות עור, פתרונות של אלרגנים משמשים: עשבי תיבול, אבקה, אפידרמיס של בעלי חיים, ארס חרקים, מזון, תרופות. מידת הרגישות האבחנתית של בדיקות העור עולה בסדר הבא: טפטוף, מריחה (עור), דקירה (בדיקת דקירה), צלקת (דרך שריטה), תוך-עורית.
בדיקות נשירה- האלרגן מוחל על עור שלם בצורה של טיפה.
דוגמאות ליישום- להרטיב ספוגית גזה בתמיסת אלרגן ולהחיל אותה על אזור שלם של העור (המשטח הפנימי של האמה או הגב). ואז אזור זה נאטם עם טיח דבק מחורר (איור 52).
אורז. 52.בדיקות יישום על עור הגב
הערכת התוצאות מתבצעת הן בשעה הראשונה לאחר מריחת האלרגן על העור (GNT), והן לאחר 24-48 שעות (HRT). היפרמיה בעור, גירוד, נפיחות, בכי באתר היישום של החומר מוערכים. בדיקות יישום הן הכרחיות להערכת הסבילות האישית של טיפולים מקומיים ומוצרי טיפוח שונים.
בדיקות צלקות- על עור נקיטיפות של אלרגנים מורחים על האמות, שריטות קטנות נעשות דרכן בעזרת מצלקת חד פעמית (איור 53).
אורז. 53.הגדרת בדיקות צלקות
מבחני דקירה- מורחים טיפות אלרגנים על העור הנקי של האמה, מבוצעות דרכם הזרקות קלות במחטים חד פעמיות (בעומק מילימטר אחד).
בדיקות תוך עוריות- בדילול 1:100 (ביחס לבדיקות עור), האלרגן מוזרק תוך עור לעור האמה בנפח של 0.1 מ"ל. בדיקות תוך-עוריות מבוצעות עם אלרגנים בשאיפה במצבי אבחון קשים, כאשר עדויות קליניות מצביעות בתוקף על נוכחות של רגישות, ותוצאות בדיקות העור מוטלות בספק. בדיקות תוך עוריות עם אלרגנים למזון אסורות בהחלט בשל רגישותן המוגזמת והאפשרות לעורר תגובה אנפילקטית.
התוויות נגד לבדיקת עור:
- החמרה של המחלה האלרגית הנוכחית;
- מחלה זיהומית חריפה (ARVI, דלקת שקדים וכו ');
- מחלה כרונית בשלב של חוסר פיצוי;
- הריון;
- תהליך שחפת של כל לוקליזציה במהלך תקופת ההחמרה;
- מחלת נפש בתקופת החמרה;
- קולגנוזות;
- מחלות ממאירות;
- טיפול ארוך טווח בקורטיקוסטרואידים או מריחה מקומית של קורטיקוסטרואידים באזור העור שבו הבדיקה אמורה להתבצע (להפסיק שבועיים לפני הבדיקה);
- נטילת אנטיהיסטמינים (לסרב יום לפני הבדיקה);
- גיל מעל 60 שנים.
במצבים כאלה, בדיקת עור אסורה או מתעכבת.
בדיקת עור אינה מתאימה עבור:
- אינדיקציה באנמנזה של תגובה חריפה לאלרגן ספציפי (כדי למנוע תגובות אנפילקטיות אפשריות);
- אין חשד לאופי אלרגי של המחלה;
- סירוב הורי ילד חולה או החולה עצמו מבדיקה;
- למטופל יש דרמוגרפיה בולטת;
- למטופל יש מחלות עור זיהומיות או נגעים בעור (ללא אזורים לא מושפעים לבדיקה).
במצבים כאלה, בדיקת העור נדחית או שימוש בשיטות אבחון מעבדתיות.
מבוצעות בדיקות אלרגולוגיות בחדר הטיפולים במחלקה האלרגולוגית בפיקוח אלרגולוג.
לא יותר מ-15 בדיקות עם אלרגנים שונים ו-2 בקרות מתבצעות בו זמנית. ביקורת חיובית מכילה היסטמין ומציינת שכל תנאי הבדיקה מולאו. הבקרה השלילית מכילה נוזל שלא אמור לגרום לתגובות עור (למשל תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית). תוצאות בדיקות העור מוערכות ביחס לביקורות. אם המטופל נטל אנטיהיסטמינים לפני בדיקת העור, אזי הביקורת החיובית ובדיקות האלרגן לא יתנו תגובה.
תוצאת HIT חיובית נרשמת אם, 20 דקות לאחר מגע עם האלרגן:
- יש שלפוחית (שלפוחית) או אריתמה;
- רק אריתמה בקוטר של יותר מ-20 מ"מ נצפתה;
- יש סימנים תגובה כללית(סחרחורת, בחילות).
במקביל, מידת תגובת העור לאלרגן מוערכת בסולם מאחד (+) לארבעה (++++) פלוס:
+ - שלפוחית או אריתמה עד 3 מ"מ;
++ - שלפוחית או אריתמה עד 6 מ"מ;
+++ - שלפוחית או אריתמה עד 10 מ"מ;
++++ - שלפוחית או אריתמה יותר מ-10 מ"מ.
הבקרה החיובית צריכה להראות תגובה ל-++ או +++ והבקרה השלילית לא צריכה להראות כלום.
אורז. 54.תוצאות בדיקת העור
תוצאות חיוביות של בדיקת עור מעידות רק על נוכחות של רגישות לאלרגן ואינן הוכחה למשמעות הסיבתית שלו בהתרחשות המחלה. ניתן לשקול אלרגן שבדיקת העור לגביו חיובית הגורם למחלה, רק אם זה עולה בקנה אחד עם ביטויים קליניים ונתוני אנמנזה. יחד עם זאת, זיהוי בזמן של רגישות לאלרגנים ממלא תפקיד מכריע במינוי אמצעי מניעה.
אם היה חשד לאלרגיה לאלרגן מסוים ותוצאת בדיקת העור שלילית, זה לא שולל אלרגיה לאותו אלרגן. ניתן לחזור על הבדיקה עם קבוצות אחרות של אותו אלרגן, שכן קבוצות אלרגנים שונות, בהתאם לסטנדרטיזציה של האלרגנים ורגישות הפרט, עשויות לפעול אחרת. בנוסף, יש לזכור כי רגישות העור והריריות (לחמית העיניים, רירית האף) שונות זו מזו. לכן, במקרה של אי התאמה בין התוצאות או ספקות, מבוצעות בדיקות חיסול-פרובוקטיביות.
הצורך בבדיקות אלימינציה-פרובוקציה מתרחש לרוב בחולים עם אטופיק דרמטיטיס, שכן יש להם בדיקות עור חיוביות עבור מגוון אלרגנים למזון, בעוד ש-1-3 מזונות הם בדרך כלל משמעותיים מבחינה קלינית. אם במצבים כאלה, בהתבסס רק על תוצאות בדיקות עור, ללא ביצוע בדיקות אלימינציה-פרובוקציה, להוציא מוצרים רבים מהתזונה, הדבר לא יהיה מוצדק.
IIIאה הקש על ALMI. הצהרה על דגימות פרובוקטיביות כרוך בשחזור הסימפטומים של תגובה אלרגית באמצעות מגע מאולץ עם האלרגן במהלך הפוגה.
בדיקות פרובוקטיביות משמשות לפי אינדיקציות מחמירות, כאשר יש סתירות בין נתוני האנמנזה, תוצאות בדיקות העור ונתוני בדיקת המעבדה. אם אתה אלרגי לתרופה מסוימת, לא מומלץ לבצע בדיקות פרובוקטיביות. בדיקות פרובוקטיביות מבוצעות במרכזים מיוחדים, שכן תגובת הלם אפשרית אפילו עבור מיקרוגרם של התרופה.
לבדיקות פרובוקטיביות, ניתן להשתמש בבדיקות אוראליות (מזון), לחמית, אף, אינהלציה או קר. אם מתפתחת תגובה אלרגית בתגובה להחדרת האלרגן המשוער, אזי האלרגן יכול להיחשב כמשמעותי סיבתי.
IVשלב ALMI. הַצָגָה מבחני חיסול. בדיקות אלימינציה משמשות לאשר את האלרגן הסיבתי אם יש מגע מתמיד איתו (למשל, אלרגיה למזון). דיאטת אלימינציה שאינה כוללת מזונות מסוימים שיש להם השפעה ספיגה על גוף המטופל נקבעת למשך 1-2 שבועות. כאשר מצבו של החולה משתפר, מתבצעת בדיקה פרובוקטיבית המאשרת את האלרגן הסיבתי.
Vשלב ALMI. שיטות מעבדה זיהוי מולקולות Ab effector ואמינים פעילים ביולוגית, כמו גם לימפוציטים רגישים לאלרגנים, המתווכים ביטויים קליניים תגובות אלרגיות. שיטות מעבדה לאבחון אלרגיות משמשות בנוכחות התוויות נגד לבדיקות עור. שיטות מעבדה לאבחון אלרגיות נלמדות בפירוט בקורס אימונולוגיה.
לאחר בדיקה אלרגולוגית של החולה, ממלא הרופא דרכון של חולה אלרגיה - מסמך רפואי המכיל את כל המידע על המחלה האלרגית ממנה סובל האדם. דרכון (או עותק שלו) הסובל מאלרגיות תמיד צריך להיות איתו ולהראות בעת הפניה לקבלת טיפול רפואי.
ציון ALMI.
היתרונות של ALMI:
שיטה מוקדמת לאבחון GNT. בעת קביעת בדיקות עור אלרגיות, ניתן לזהות רגישות לאלרגן מסוים (למשל, אבק בית, סטרפטוקוק), גם ללא סימני יישום בתגובה אלרגית. בדיקות אלרגיה בעור משמשות גם לקביעת מצב הרגישות לאנטיביוטיקה ולסרים הטרוגים.
תוצאות מהירות בעת הגדרת בדיקות עור אלרגיות לאבחון GNT.
שיטות מעבדה לאבחון GNT ב מבחנה מועדף על בטיחות ואפשרות שימוש בכל תקופה של המחלה. יש להן חשיבות עיקרית במקרים בהם לא ניתן להשתמש בבדיקות אלרגיה לעור ובבדיקות פרובוקטיביות.
זיהוי של האלרגן הסיבתי מאפשר טיפול בחוסר רגישות מבוסס פתוגנטי;גישה זו משמשת כיום בצורה המוצלחת ביותר עבור קדחת השחת (אלרגיה לאבקה).
מבחן נפילה.
תמיסות מימיות של חומרים משמשות לבדיקות טיפת עור. בדרך כלל משתמשים בריכוזים נמוכים של אלרגנים, למשל, תמיסה של 0.25% של נובוקאין, 50,000 פניצילין. טיפה של תמיסת האלרגן מוחלת על העור השלם (משטח וולארי) של האמה, הבטן. במקביל, מניחים דגימת טיפת בקרה עם ממס (מלח פיזיולוגי או מים מזוקקים).
תוצאות בדיקת הנפילה נרשמות לאחר 20 דקות ויום לאחר מריחת תמיסת הבדיקה חומר רפואי. אם במקום היישום של התרופה יש היפרמיה, נפיחות, אז התגובה חיובית, התרופה הזולא ניתן להקצות.
בדיקת עור ליישום.
בדיקות עור יישום נעשות על פני השטח הוולארי של האמה, על הבטן ועל הגב. במקביל, מורחים על העור גזה בגודל 2X2 ס"מ המורטבת בתמיסה של החומר הרפואי הנחקר. נייר דחיסה או צלופן מורחים על גבי הגזה, לאחר מכן מודבקים חתיכת טיח דבק 4X4 ס"מ. ממס הבקרה (תמיסת מלח) נעשה באותו אופן.
התוצאות מוערכות לאחר 24-72 שעות באופן הבא: היפרמיה (+); hyperemia, נפיחות, היווצרות של papules (++); אריתמה בהירה, נפיחות, פפולות, שלפוחיות (+++); היווצרות שלפוחיות גדולות ונמק (++++). הטיח הדביק במקומות של מגע ישיר עם העור, גורם, ככלל, לגירוי בעור (תגובה ישירה - היפרמיה, בצקת), לכן, רק אזור העור שנמצא במגע ישיר עם הגזה המורטבת בתרופה יש להעריך את הפתרון.
במקרה של עלייה חדה בתגובה אלרגית (גירוד, תחושת צריבה וכו'), יש להסיר את הדגימה במהירות ולשטוף אותה. עורואל תרשום תרופה זו.
בדיקת צלקת עור.
לפני קביעת בדיקה זו - יש לטפל בעור (גב, בטן או פני השטח הפנימיים של האמה) באלכוהול. לאחר מכן, במרחק של 5 ס"מ אחד מהשני, מורחים טיפה של תמיסת היסטמין 0.01% (שליטה חיובית), טיפה של אלרגן תרופת הבדיקה וטיפה של נוזל דילול - מי מלח פיזיולוגי(שליטה שלילית). מחטים או מצלקות סטריליות מורחות שתי צלקות שטחיות (לא מדממות) באורך של עד 5-10 מ"מ, במרחק של 3 מ"מ זה מזה. התגובה מוערכת לאחר 20 דקות על ידי השריית טיפות האלרגן עם צמר גפן נפרד. יש צורך להסתכל לאחר 24 שעות (ייתכנו תגובות מאוחרות).
אם מתפתחת היפרמיה במקום ההצטלקות, וכאשר העור נמתח, מתרחשת נפיחות (הלבנה) במקום השריטות, התגובה חיובית חלשה (+).
אם שלפוחית עם היפרמיה במקום השריטות נראית לעין, וכאשר מושכים אותה, הבצקת מתגברת, אז התגובה חיובית (++).
שלפוחית בקוטר 10 מ"מ עם היפרמיה ופסאודופודיה מעידה על תגובה חיובית חדה (+++).
שלפוחית גדולה מ-10 מ"מ בקוטר עם פסאודופודיה והיפרמיה מעידה על תגובה חיובית במידה חדה מאוד (++++).
מבחן תת לשוני פרובוקטיבי.
לפני הבדיקה יש לבדוק את האזור התת לשוני. המטופל מקבל 1/4 מינון טיפולי בודד של התרופה הנבדקת מתחת ללשון. בְּ מדגם חיובילאחר 10-20 דקות, המטופל מפתח נפיחות של הפרנוlum של הלשון, נפיחות של השפתיים, גירוד; פריחות אורטיקריאליות בודדות או נפוצות. במקרה זה, על המטופל להסיר מיד את שארית התרופה, לשטוף את הפה מבלי לבלוע נוזלים ולקחת אנטיהיסטמינים.
מבחן פרובוקטיבי.
אוראלי:
המטופל מקבל 1/4 מינון טיפולי בודד של המוצר התרופתי שנבדק. בבדיקה חיובית עלולים להופיע חנק, אלמנטים חדים וחום במהלך השעתיים הקרובות. במקרה זה, המטופל מקבל חומר משלשל מלוחים ורשום אנטיהיסטמינים.
הורי:
רבע מנה בודדת מוזרקת תוך שרירית לאזור הירכיים, אם התרופה ניתנת תוך שרירית; s / c - באמה, אם התרופה מוזרקת תת עורית ומוערכת לאחר 20 דקות. אם התוצאה שלילית, ניתנת מנה בודדת לאחר שעתיים. בעת עריכת בדיקה עם תרופה עבור מתן תוך ורידיהכנת תמיסה לווריד הזרקת טפטוףוהוזרק באיטיות 10-20 טיפות לדקה למשך 2-5 דקות. בהיעדר משותף תסמינים קלינייםושינויים בהמודינמיקה, מתן החומר הרפואי נמשך.
בדיקות פרובוקטיביות מבוצעות על ידי רופא בשליטה של המודינמיקה.
בדיקת עיכוב של הגירה טבעית של לויקוציטים in vivo לאבחון ספציפי של אלרגיה לתרופות (TTD)
עבור TTEL אתה צריך:
ציוד: (עבור מחקר אחד)
1. 4 כוסות כימיקלים בנפח 50 מ"ל.
2. 5 מבחנות בנפח 20 מ"ל.
3. מתלה למבחנות (1).
4. 2 פיפטות (1.0 ו-10.0 מ"ל).
5. מיקרופיפטות (2).
6. תא ספירה של Goryaev (1).
7. זכוכית שעון (1).
8. מיקרוסקופ משקפת (ob.20, ok.7)
ריאגנטים:
1. תמיסה פיזיולוגית pH 7.3-7.4 (pH של התמיסה נקבע על ידי הוספת 0.1 M NaOH באמצעות פוטנציומטר PP-0.1).
2. תמיסה 0.01% של צבע סגול ג'נטיאן בחומצה אצטית 3%.
תרופות:
לצורך המחקר, נעשה שימוש בצורות מסיסות במים של תרופות בריכוזים הבאים:
1. פניצילין - 1 מיקרון/מ"ל.
2. Cephalosporins (cefazolin, kofzol, cefamisin) - 1 mcg / ml.
3. אמינוגליקוזידים (סטרפטומיצין, קנאמיצין, גנטמיצין) - 10 מק"ג/מ"ל.
4. מקרולידים (אריתרומיצין) - 10 מק"ג/מ"ל.
5. כלורמפניקול (levomycetin) -10 מק"ג/מ"ל.
6. טטרציקלינים -10mcg/ml.
7. תכשירי סולפנילמיד - 100 מק"ג/מ"ל.
8. נגזרות של פירזולון וחומצה אצטילסליצילית - 100 מיקרוגרם/מ"ל.
9. חומרי הרדמה מקומיים (נובוקאין, לידוקאין, טרימקאין) - 100 מק"ג/מ"ל.
10. אנטיביוטיקה של אחרים קבוצות כימיות- 10 מק"ג/מ"ל.
אם למטופל יש היסטוריה של תגובות אנפילקטיות למתן תרופות, אז, ללא קשר לשם התרופה, מחקרים מתחילים בריכוז תרופה של 1 מיקרוגרם / מ"ל. במקרה של תוצאה שלילית חוזרים על הבדיקה עם אותה תרופה במינון של 10 מיקרוגרם למ"ל, ובמידת הצורך אז במינון של 100 מיקרוגרם למ"ל.
ביום אחד, אתה יכול לבצע רק מחקר אחד עם תרופה אחת וריכוז אחד. במהלך הבדיקה אסור לאכול, לשתות, לעשן, ליטול תרופות. הבדיקה מתבצעת בחדר טיפולים.
לפני ואחרי TTEL in vivo, הרופא בוחן היטב את המטופל, מודד לחץ דם, דופק וקצב נשימה.
הסקר מיועד ל-1.5 שעות והוא מורכב משני שלבים.
הכנת חומר למחקר:
1. שעה לאחר האכילה, המטופל שוטף היטב את חלל הפה במים רתוחים לניקוי מכני שלו במשך 2 דקות.
2. 30 דקות לאחר השטיפה הראשונה, שטפו את הקטע הקדמי של חלל הפה ב-10 מ"ל של תמיסת מלח (pH 7.3-7.4) למשך 2 דקות.
3. הנוזל מחלל הפה (מי שטיפה) נאסף בכוס מס' 1, כמנה ראשונית (בקרה).
4. לאחר 15 דקות, חלל הפה נשטף במשך 2 דקות בתמיסת מלח מדוללת בו עם הריכוז הראשוני של התרופה הנבדקת. חלק זה של נוזל הכביסה נאסף בכוס מס' 2 ובתוכו עבודה נוספתלא בשימוש.
5. לאחר 15 דקות נוספות שוטפים שוב את המקטע הקדמי של חלל הפה למשך 2 דקות עם 10 מ"ל של מי מלח (pH 7.3-7.4) ונוזל הכביסה נאסף בכוס מס' 3.
6. לאחר מכן, לאחר 15 דקות, שוטפים את המקטע הקדמי של חלל הפה למשך 2 דקות ב-10 מ"ל של מי מלח (pH 7.3-7.4) ונוזל הכביסה נאסף בכוס מס' 4.
שלב שני:
צביעה וספירה של לויקוציטים בחומר שנאסף. הכנה וצפייה במריחות מוכתמות.
1. נוזל כביסה מחלל הפה בכוס מס' 1 (מנת בקרה) לאחר הקבלה מערבבים היטב במיקרופיפטה ומניחים בכמות של 0.2 מ"ל על זכוכית שעון.
2. הוסף שם 0.04 מ"ל של תמיסת צבע סגול ג'נטיאן.
3. לאחר 5 דקות, תערובת הבדיקה מונחת מתחת לזכוכית הטחונה של תא Goryaev.
4. ספירת הלויקוציטים מתבצעת ב-100 ריבועים גדולים של תא Goryaev ומחשבת את מספר הלויקוציטים ב-1 מ"מ מעוקב.
באותו אופן, מספר הלויקוציטים בכוסות מס' 3 ו-4 נספר (מנות ניסוי)
המדד של הגירת לויקוציטים בחלל הפה מחושב על ידי הנוסחה:
|
|
כאשר Hk הוא מספר הלויקוציטים (נויטרופילים) בחלק הראשון, הראשוני, Ho הוא מספר הלויקוציטים (נויטרופילים) בכוסות ניסוי מס' 3 ו-4.
הבדיקה מוערכת כחיובית אם מספר התאים לפי מדד ההגירה יורד ביותר מ-30%.
בקשה מס' 5.
7039 0
ניתן להשתמש בשיטות אלו באופן נרחב למחלות אלרגיות בשלב האקוטי, בתקופות של מגע מסיבי עם האלרגן, עם רגישות גבוהה של החולים לאלרגן, בנוכחות התוויות נגד, בילדים, בזיהוי מחלות אלרגיות תעסוקתיות, מכיוון שהם שוללים את האפשרות של תגובות אלרגיות שווא לא ספציפיות.
בין דרכים שונותאבחון אלרגודי ספציפי בסוג התלוי IgE reaginic, הקביעה של IgE חד שבטי עדיפה יותר.
קיימות שיטות עקיפות לקביעת IgE והשיטות הישירות הנפוצות ביותר לאיתור IgE ספציפי, המבוססות על טכנולוגיות חדשות ושימוש בתכשירי אבחון בצורת אלרגנים סטנדרטיים ומוסמכים אליהם.
תגובת העברה פסיבית של Praustnitz-Küstner(שיטה עקיפה לבדיקת עור) משמשת לעתים קרובות יותר בפרקטיקה של ילדים בזיהוי אלרגיות למזון. מהות השיטה טמונה בתגובה של העברה פסיבית למקבל הרגישות באמצעות הזרקה תוך עורית של 0.1 מ"ל מסרום הדם של המטופל עם נוכחות של IgE ספציפי כביכול בתוכו. לאחר 24 שעות, 0.02 מ"ל מהאלרגן החשוד מוזרק לאותו אזור. התגובה נרשמת לאחר 20 דקות. עם זאת, האיום בהעברת איידס, דלקת כבד ויראליתוזיהומים אחרים אינם מאפשרים שימוש נרחב בשיטה זו.
קביעת IgE ספציפי
מחקר ה-IgE הכולל מתבצע באמצעות בדיקת רדיואימונוסורבנטית נייר (שיטת PRIST), קביעת ה-IgE הספציפית לאלרגו היא בדיקת רדיואלרגוסורבנטית (שיטת RAST). יחד איתם, נעשה יותר ויותר שימוש בשיטת אנזים אימונואסאי (ELISA) לקביעת IgE ספציפי לאלרגו.שיטת RAST היא הספציפית והמדויקת ביותר, שכן היא מבוססת על שימוש בתווית רדיואקטיבית. המהות שלו טמונה בחיבור של IgE ספציפי של הסרום הנחקר עם אלרגן המונח על צלחת נייר. לאחר שטיפה של IgE לא ספציפי (סה"כ), מתווספים לתוכן נוגדני אנטי-IgE המסומנים ב-125I. הקומפלקס הרדיואקטיבי המתקבל נקרא על מונה נצנצים.
שיטת ELISA
הסרום של הנבדק, המכיל IgE ספציפי, מונח בשכבות על פני הפוליסטירן של מיקרופליט עם סט ספוג של אלרגנים הקושרים רק IgE ספציפי מסוים.במבחן אימונו נקודתי, אלרגנים מוחלים כנקודות על דיסקים של ניטרוצלולוזה.
כדי לקבוע את ריכוז ה-IgE הספציפי הקשור לאלרגן, מוסיפים נוגדנים (מסומנים באנזים) ל-IgE. בשלב הבא, באמצעות ריאגנטים מיוחדים המשחזרים תגובת צבע, שעוצמתה תלויה בריכוז של lgE ספציפי בשילוב עם האלרגן, תכולת lgE ספציפית נקבעת באופן פוטומטרי בקרן אנכית במערכת Uniscan או Multiscan. בדרך כלל, הוא אינו עולה על 210 IU ליחידה.
לצד זיהוי של IgE ספציפי, בדיקות מעבדה אחרות משמשות גם לאבחון הן תגובות תלויות נוגדנים (קביעת אינדיקטורים לנזק ספציפי לבזופילים, נוגדנים אלרגיים בתגובת ההמגלוטינציה הפסיבית, תגובת קיבוע משלים וכו'), והן תגובות של סוג מושהה (תאי) (תגובת עיכוב של דם נדידת לויקוציטים - RTML, בדיקת תאים יוצרי רוזטה - ROK, בדיקת נזק לנויטרופילים וכו').
השימוש בהם בתרגול אלרגולוגי לא איבד ממשמעותו - זיהוי רגישות יתר לאלרגנים, אוטואנטיגנים מאפשר טיפול ושיקום ממוקדים יותר של החולים.
התגובה של נזק ספציפי ישיר לבזופילים בדם
בזופילים בדם, תאי פיטום הם תאי מטרה ביישום תגובות אלרגיות מסוג מיידי. lgE בעזרת מקטע Fc מקובעים על הקולטנים של הממברנות של תאים אלו, ובעזרת מקטע Fab הם מגיבים ספציפית עם האלרגן. זה מלווה בהפעלה חדה (דהגרנולציה) של תאי מטרה, המשמשת כסמן לתגובה אלרגית.כדי להגדיר את התגובה, מוסיפים 5 מ"ל מדם הבדיקה לצינור צנטריפוגה עם 5 טיפות של 6% תמיסה מימיתטרילון B והודגר במשך שעה אחת ב-37 מעלות צלזיוס. ההשעיה המתקבלת של לויקוציטים מועברת באמצעות פיפטת פסטר לתוך מבחנה נקייה, ולאחר מכן מוזגת לשתי צינורות צנטריפוגות של 0.3 מ"ל. במבחנה הראשונה (ניסיוני) מוסיפים 0.1 מ"ל תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית, בה מומסת מינון העבודה של האלרגן, בשנייה (ביקורת) - 0.1 מ"ל תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית ללא האלרגן.
שני הצינורות מודגרים למשך 10 דקות ב-37 מעלות צלזיוס, ואז עוברים בצנטריפוגה למשך 10 דקות ב-1500 סל"ד. לאחר מכן, נוזל הסופרנטנט מתנקז, ומסת הלויקוציטים שנותרה בתחתית הצינור, רועדת בעדינות, מתפרקת בשארית הנוזל הזורם מהקירות. באמצעות פיפטת פסטר, תכולת כל צינור מועברת לשקופיות זכוכית נפרדות (בצורת טיפה על הקצה) ומכינים מריחות לויקוציטים דקות באמצעות קצה טחון של כוס אחרת.
מריחות מוכתמות באאוזין-מתילן כחול לפי May-Grunwald למשך 1-2 דקות לאחר הייבוש באוויר. לאחר שטיפת התכשיר במתיל אלכוהול, מריחות-תרופות עוברות מיקרוסקופ עם טבילה (הגדלה 10 x 80). 50 בזופילים נספרים לאורך קצוות המריחה ומספר התאים האמצעיים הפגועים. מדד התאים הפגועים בתכשירי הניסוי והביקורת נקבע על ידי הנוסחה:
התגובה נחשבת חיובית עם אינדיקטור של 1.4 ומעלה.
לָה. Dueva et al. (1986) בחרו את ריכוזי העבודה והמינונים של אלרגנים כימיים ואנטיביוטיקה לתגובה של נזק ספציפי ישיר לבזופילים בדם (טבלה 4).
טבלה 4. ריכוזי עבודה ומינונים של ריאגנטים עבור RSPB
בדיקת הרס תאי פיטום
כדי לקבל השעיה תאי תורן 8-10 מ"ל (עכברים - 2-5 מ"ל) של תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית מחוממת עד 37 מעלות צלזיוס, מוכנה במאגר פוספט 0.15 מול עם pH 7.2, מוזרקת תוך צפקית לתוך החולדה, מעסה בעדינות את הבטן. תרחיף תאי התורן נשטף בתמיסת נתרן כלוריד איזוטונית, ולאחר מכן מרוכז בצנטריפוגה ב-500 סל"ד.תרחיף תאי הפיטום (0.02 מ"ל) והנסיוב של המטופל (0.02 מ"ל) מודגרים למשך 15 דקות ב-37 מעלות צלזיוס, לאחר מכן מוסיפים 0.02 מ"ל מהאלרגן בריכוז שנבחר מראש ודגירה שוב למשך 15 דקות ב-37 מעלות צלזיוס. שלושה פקדים מוכנים בו זמנית: תאי פיטום ללא סרום וללא אלרגן; תאי מאסט עם סרום נטול אלרגנים; תאי מאסט עם אלרגן ללא סרום.
לאחר צביעה של הדגימות בתמיסת 0.025% של טולואידין כחול או בתמיסה של 0.3% של צבע ניטרלי, ממלאים את חדרי Goryaev בתרחיף של תאי פיטום והתאים המוכתמים נספרים, תוך השוואה בין מספר התאים המגורעים בבקרה הניסוי. הדגרנולציה שנצפתה של תאי פיטום בדגימת הבדיקה נחשבת לחיובית חלשה בנוכחות של 10-20% דה-גרנולציה, חיובית - ב-21-40%, חיובית מאוד - עם דה-גרנולציה של יותר מ-40% מהתאים בהשוואה לביקורת.
ריכוז האלרגנים שאינו גורם לדיגרנולציה ספונטנית, לאנטיביוטיקה - 100-1000 U / ml, אשלגן דיכרומט ויוד, נתרן כרומט, ניקל גופרתי - תמיסה 0.01-0.1%, פורמלדהיד - 0.2-0.4%. משתמשים באלרגנים ביתיים במינון של 10 עד 100 PNU.
בדיקת ההמגלוטינציה הפסיבית (RPHA) מאפשרת לזהות נוגדנים לאלרגנים מסיסים במים ובלתי מסיסים במים.
התגובה מבוססת על תופעת האגלוטינציה של אריתרוציטים שעברו רגישות במבחנה לאלרגנים כימיים כאשר מוסיפים סרום של המטופל המכיל נוגדנים אנטי-הפטן.
התגובה של עיכוב נדידה של לויקוציטים בדם (RTML) מבוססת על יכולתם של לימפוציטים מסוג T רגישים (לדוגמה, להפטנים) להפריש לימפוקין, גורם המעכב את נדידת הלויקוציטים. בעזרת RTML מתגלה תגובה מסוג תא (שאינה תלוית נוגדנים) לאנטיגנים שונים.